【摘 要】
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目的 探讨华盖散的抗肿瘤活性及可能作用机制.方法 选取对数生长状态良好的H1688和A549肺癌细胞以5×103/孔的密度接种于96孔板,细胞中分别加入125、250、500、1000 μg/ml的
【机 构】
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河北医科大学第四医院,河北省石家庄市长安区健康路12号,050011;河北中医学院
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目的 探讨华盖散的抗肿瘤活性及可能作用机制.方法 选取对数生长状态良好的H1688和A549肺癌细胞以5×103/孔的密度接种于96孔板,细胞中分别加入125、250、500、1000 μg/ml的华盖散(华盖散组),另设空白组,每组5个复孔.在37℃、5％ CO2条件下孵育处理肺癌细胞24、48、72h后,观察不同浓度华盖散作用不同时间对细胞增殖的影响及干预24 h后对肺癌细胞凋亡的影响.采用TMT标记定量蛋白质技术联合液相色谱-串联质谱技术分析华盖散作用H1688细胞24h后肺癌细胞中的差异表达蛋白,并利用生物信息学分析筛选的差异蛋白,最后经Western blot方法验证差异蛋白结果.结果 与空白组比较,华盖散组250、500、1000 μg/ml浓度各时间均能够一定程度上降低H1688和A549细胞增殖率,提高细胞凋亡率,具有剂量依赖性(P＜0.05).蛋白质组学分析表明,华盖散干预能够引起112个蛋白的差异表达,其中上调蛋白58个,下调蛋白54个.筛选出与细胞增殖和凋亡相关的泛素样含PHD和环指域(UHRF1)、αB-晶状体蛋白(CRYAB)、生长抑制因子3(ING3)和PRKCZ凋亡WT1调节器(PAWR)蛋白进行Western blot验证,结果显示华盖散组ING3和PAWR蛋白表达下调,UHRF1和CRYAB蛋白表达上调(P＜0.05).结论 华盖散可抑制H1688和A549肺癌细胞增殖,诱导凋亡,UHRF1、CRYAB、ING3和PAWR有可能为其治疗肺癌的生物标志.
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