论文部分内容阅读
目的
对比胰酶消化法和混合酶(Ⅱ型胶原酶＋Ⅰ型DNA酶)消化法分离小鼠胶质瘤浸润免疫细胞的效果。
方法没有分组情况提取接种GL261胶质瘤细胞系21天后C57BL/6小鼠的脑组织，剪碎后A组用胰酶消化法，B组采用混合酶(Ⅱ型胶原酶＋Ⅰ型DNA酶)消化法分别消化组织，通过Percoll密度梯度离心法获取肿瘤浸润免疫细胞，使用流式细胞术比较提取免疫细胞的表型特点。
结果混合酶(Ⅱ型胶原酶＋Ⅰ型DNA酶)消化法(B组)后，提取的小胶质细胞上CD11b的荧光强度比胰酶消化的A组强(P<0.05)；肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages，TAM)、浸润的淋巴细胞、CD8＋T细胞的比例和数量明显高于A组胰酶消化后得到的细胞(P<0.05)；CD4＋ T细胞的数量明显高于A组胰酶消化后得到的细胞(P<0.05)。
结论混合酶(Ⅱ型胶原酶＋Ⅰ型DNA酶)消化法得到的肿瘤浸润免疫细胞增多，细胞表面膜蛋白不受破坏，适用于对胶质瘤浸润免疫细胞的分析。