【摘 要】
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目的 将血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)种植于体外制备的猪脱钙骨基质支架中,予适当压力干预,观察动态压力对EPCs形成血管能力的影响.方法 采用密度梯度
【机 构】
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中国医科大学附属盛京医院脊柱创伤骨科,沈阳市第四人民医院骨科
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目的 将血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)种植于体外制备的猪脱钙骨基质支架中,予适当压力干预,观察动态压力对EPCs形成血管能力的影响.方法 采用密度梯度离心法结合差速贴壁筛选法分离出骨髓单个核细胞,用条件培养液从原代开始诱导培养,诱导其形成EPCs,并对诱导细胞进行免疫荧光鉴定.取猪脊柱椎体松质骨,通过组织固定、脱脂、脱钙等步骤制备脱钙骨基质支架.取第三代EPCs种植在脱钙骨基质支架,将细胞一支架复合物分为两组,压力组给予动态压力,对照组直接培养,观察两组支架上的细胞血管形成能力.RT-PCR检测EPCs分化相关因子vWF和Flk-1的mRNA表达.结果 两组HE染色和荧光染色可见血管束形成,且压力组细胞血管束形成明显多于对照组.RT-PCR检测vWF和Flk-1 mRNA的表达情况,压力组表达明显高于对照组.结论 给予适当压力干预后脱钙骨基质与EPCs复合构建组织工程骨能明显促进移植骨的血管化,在修复骨缺损方面具有临床应用价值.
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