【摘 要】
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目的乙型肝炎病毒核糖核酸酶H(HBV-RNaseH)为该病毒生活周期中负链DNA合成所必需,获取该基因片段及其表达蛋白,为进一步的基础研究及应用研究创造条件. 方法以 HBV全基因片段
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目的乙型肝炎病毒核糖核酸酶H(HBV-RNaseH)为该病毒生活周期中负链DNA合成所必需,获取该基因片段及其表达蛋白,为进一步的基础研究及应用研究创造条件. 方法以 HBV全基因片段为模板,PCR方法定位扩增HBV-RNaseH特异性片段,连接于pT7Blue克隆载体 ,酶切鉴定并测序后克隆于pGSTag载体进行原核表达. PAGE电泳及Western杂交鉴定表达产物. 结果 DNA测序结果显示PCR扩增产物及载体中插入片段与已知序列相同;Western杂交结果表明,所表达产物为GST与RNaseH的融合蛋白. 结论 HBV-RNaseH基因的成功克隆及表达为进一步研究HBV感染的早期诊断及乙肝患者的治疗奠定了基础.
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