波长切换HPLC法同时测定水蛭蛴螬化瘀片中10个活性成分的含量

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目的:建立多波长切换HPLC法同时测定水蛭蛴螬化瘀片中丹参素钠、丹酚酸B、黄芩素、汉黄芩素、黄芩苷、汉黄芩苷、异鼠李素-3-O-新橙皮苷、甘草酸铵、延胡索乙素、芍药苷10个成分的含量。方法:采用岛津Insertsustain C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以0.2%醋酸水溶液-甲醇-乙腈为流动相梯度洗脱,DAD检测器,检测波长为280 nm(020 min,3336 min,38.842 min检测丹参素钠、延胡索乙素、黄芩苷),230 nm(2029 min,检测芍药苷),254 nm(2933 min,检测异鼠李素-3-O-新橙皮苷),252 nm(6270 min检测甘草酸铵),286 nm(3638.8 min检测丹酚酸B),274 nm(4248 min,7080 min检测汉黄芩苷、汉黄芩素),276 nm(4862 min,检测黄芩素),流速1.0 mL·min-1,柱温为25℃。结果:通过1次进样,同时测定了上述10个成分的含量,丹参素钠、丹酚酸B、黄芩素、汉黄芩素、黄芩苷、汉黄芩苷、异鼠李素-3-O-新橙皮苷、甘草酸铵、延胡索乙素、芍药苷的进样质量浓度分别在6.32158μg·mL-1(r=0.999 8)、53.41 336μg·mL-1(r=0.999 9)、1.5137.8μg·mL-1(r=0.999 9)、0.88822.2μg·mL-1(r=0.999 9)、18.6465μg·mL-1(r=0.999 9)、7.92198μg·mL-1(r=0.999 9)、2.1453.6μg·mL-1(r=0.999 8)、3.3082.6μg·mL-1(r=1.000 0)、1.1228.0μg·mL-1(r=0.999 9)、38.5962μg·mL-1(r=0.999 9)与峰面积呈良好线性关系;平均加样回收率(n=6)分别为97.0%(RSD=1.6%)、99.1%(RSD=1.4%)、99.0%(RSD=1.4%)、98.1%(RSD=1.6%)、99.2%(RSD=0.98%)、100.2%(RSD=1.8%)、98.7%(RSD=2.6%)、100.4%(RSD=1.7%)、100.2%(RSD=3.0%)、100.5%(RSD=2.2%);3批中试样品中上述10个成分含量测定结果依次为2.1122.119 mg·g-1、15.64215.648 mg·g-1、1.5581.568 mg·g-1、0.5530.568 mg·g-1、16.51516.527 mg·g-1、4.4124.423 mg·g-1、0.5540.569 mg·g-1、3.3533.368 mg·g-1、0.1920.201 mg·g-1、8.7498.761 mg·g-1。结论:该方法可用于水蛭蛴螬化瘀片的质量控制,为其质量标准的建立奠定了基础。
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