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[摘要] 目的 了解我院泌尿系感染病原菌分布情况和耐药性变迁趋势，为临床用药提供实验室参考依据。 方法 用VITEK2-Compact全自动细菌分析仪，药敏同时兼做K-B法按最新版本的NCCLS折点对我院2011～2013年确诊泌尿系感染患者送检的10049份中段尿液标本进行检测。 结果 在10049份中段尿液标本中共检出病原菌3187株，阳性分离率为31.7%，主要病原菌检出顺序是大肠埃希菌1107（34.7 %）、凝固酶阴性葡萄球菌 379（11.9%）、肠球菌属275（8.63%）肺炎克雷伯菌234（7.34%）。肠杆菌科细菌对哌拉西林他唑巴坦和碳氢酶烯类抗生素亚胺培南、美洛培南耐药性较低，革兰阳性球菌没有发现对糖肽类抗生素万古霉素、替考拉宁的耐药株。 结论 泌尿系感染病原菌以革兰阴性杆菌大肠艾希菌为主，细菌对常用抗菌药物的耐药性较高。实验室应定时监测本地区泌尿系感染的主要病原菌菌群和其耐药性变迁，为临床合理选择抗生素提供参考。
[关键词] 尿液培养； 病原菌； 耐药性 ；革兰阳性球菌；革兰阴性杆菌
[中图分类号] R446.5 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2015）01-0061-03
Urinary tract infection pathogen distribution and resistance analysis
ZHANG Zhimin1 QIU Weiqiang1 WANG Rui2
1.Clinical Laboratory， the Center Hospital in Zhumadian City，Zhumadian 463000，China；2.Clinical Laboratory， Zhumadian Hospital of TCM，Zhumadian 463000，China
[Abstract] Objective To understand the hospital urinary tract infection pathogenic bacteria distribution and drug resistance change trend and provide laboratory reference for clinical medication. Methods Bacteria in VITEK2-compact automatic analyzer， susceptibility and K-B method according to the latest version of NCCLS fold point in our hospital from 2011 to 2013 patients with diagnosis of urinary tract infection were midway through 10049 urine specimens for testing. Results 3187 strains pathogenic bacteria were detected of 10049 urine specimens， separation of positive rate was 31.7%， the main pathogen detection sequence was e.coli 1107（34.7%）， coagulase negative staphylococcus 379（11.9%） genera and 275（8.63%）， klebsiella pneumoniae（7.34%） of 234. Enterobacteriaceae bacteria of piperacillin his temple and hydrocarbon enzyme alkenes antibiotics imine southern culture， beauty culture south resistance is low， did not find to sugar peptide antibiotics were gram positive coccus vancomycin resistant strains and their stead ning. Conclusion Urinary tract infection pathogens is given priority to with gram-negative bacterium escherichia athey bacteria， bacterial resistance to commonly used antimicrobial agents is higher. Laboratory shall regularly monitor the region the main pathogenic bacteria of urinary tract infection and their resistance to change， and to provide reference for reasonable selection of antibiotics.
[Key words] Urine culture； Pathogenic bacteria； Drug resistance；Gram positive coccus；Gram negative bacilli
泌尿系感染（UTI）是指大量微生物在尿路中生长繁殖而引起的尿路炎症，可分为上尿路感染和下尿路感染，多见于成年女性，为最常见的感染性疾病[1]。尿液细菌培养是诊断UTI的金标准，药物敏感性试验对于UTI的治疗有指导作用，为了更加详细地了解UTI病原菌的分布与耐药情况，为临床合理选择抗生素提供实验室依据，减轻患者负担，提高治疗效果，延缓耐药株的产生，现将我院2011年1月1日～2013年12月31日确诊UTI患者的中段尿液培养检出病原菌的分布和药物敏感性试验结果进行分析，现报道如下。 1 资料与方法
1.1 一般资料
收集我院住院患者2011年1月1日～2013年12月31日送检的10049份尿液标本培养，分离病原菌。同一患者连续多次分离的相同菌株，取首次分离菌株，去除重复菌株。
1.2方法
1.2.1 标本采集与阳性判断标准 嘱患者在清洗外阴后，无菌条件下留取中段尿液标本及时送检，选择患者的尿液两份作为实验样品，一份做普通琼脂平板菌落计数，另一份取10 μL分别接种于血平板和中国蓝平板上，放置在37℃的温箱中培养18～24 h后观察细菌菌落形态分布，24 h无细菌生长者继续放置到48 h，如仍无细菌生长报阴性。尿路感染的判定的标准分为两种情况；①革兰阳性球菌菌落数≥104 cfu/mL；②革兰阴性杆菌菌落数≥105 cfu/mL。
1.2.2 鉴定和药敏方法 按全国临床检验操作规程，采用法国梅里埃的VITEK2-Compact全自动细菌鉴定仪对细菌鉴定和药敏试验，药敏试验同时兼做K-B法，根据美国临床实验室标准化研究所（CLSI）最新版本规定的折点进行结果判断。所用纸片均用卫生部临床检验中心提供的大肠埃希菌ATC25922，金黄色葡萄球菌ATC29213、铜绿假单胞菌ATC27853、粪肠球菌ATC 29212质控，上机鉴定和药敏板用大肠埃希菌ATC25922，金黄色葡萄球菌ATC29213质控。
1.3 统计学方法
所有数据采用世界卫生组织推荐的WHONET8.4软件进行处理。
2 结果
2.1 菌种的分布
10049例尿路感染患者的中断尿培养共分离病原菌3187株，检出阳性率31.7%，这与有关报道相似[2，3]。其中革兰阴性杆菌1769株，占55.5%；革兰阳性菌707株，占22.1%；真菌711株，占22.3%。排名前四位的细菌依次是大肠埃希菌1107株，占34.7%；凝固酶阴性葡萄球菌 379株，占11.9%；肠球菌属275株，占8.63%；肺炎克雷伯菌234株，占7.34%；3187株病原菌菌种分布见表1。
2.2 常见革兰阳性病原菌对所测抗菌药物的耐药性
707株革兰阳性球菌对常用抗菌药物如青霉素类、头孢类、大环内酯类、磺胺类、克林霉素类、喹诺酮类均有不同程度的耐药，但没有发现万古霉素、替考拉宁耐药株，主要革兰阳性菌对常用抗菌药物的药敏结果见表2。
2.3常见革兰阴性病原菌对所测抗菌药物的耐药性
1769株革兰阴性杆菌对所测抗菌药物的耐药性见表2。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、变形杆菌耐药性前8位的是氨苄西林、头孢唑啉、哌拉西林、复方新诺明、左氧氟沙星、呋喃妥因、氨苄西林他唑巴坦、氨曲南，对碳氢酶烯类抗生素耐药率最低。
3讨论
UTI是由多种病原微生物和寄生虫感染所致的疾病，细菌感染引起的UTI占绝大部分，而又以革兰阴性菌引起的感染最多[4]。这与本次结果相似，我们医院引起UTI的菌群中，革兰阴性杆菌1769株，占55.5%，革兰阴性菌又以大肠埃希菌为主，占34.7%；阳性菌以凝固酶阴性葡萄球菌为主，占11.9%，大肠埃希菌极易引起UTI，一是因为大肠埃希菌是肠道正常菌群，由于生理性特点，离泌尿道口较近，易污染泌尿道；二是因为尿道上皮细胞表面的甘露糖受体可与大肠埃希菌的纤毛结合，从而增加了感染机会[5，6]。
革兰阴性杆菌引起的感染中，大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、变形杆菌对氨苄西林、头孢唑啉、复方新诺明、呋喃妥因耐药率较高，均大于70%；对头孢他啶、头孢吡肟、头孢替坦、米诺环素呈现轻度耐药，在20%～40%之间；而对哌拉西林他唑巴坦、阿米卡星耐药绿较低，在10%～20%之间，碳青酶烯类抗生素亚胺培南、美罗培南耐药率较低，小于10%，碳氢酶烯类抗生素是革兰阴性杆菌感染的顶级抗生素，有些文章建议为首选抗生素[7]，但是由于碳氢酶烯类抗菌谱广，易导致菌群失调引起真菌二重感染，且为临床第三类药，临床易慎用[8]于革兰阴性杆菌。就抗菌药物整体而言，变形杆菌属对抗菌药物较为敏感，因此细菌药敏实验对于临床选择用药十分重要。
在革兰阳性葡萄球菌属引起的感染中，青霉素、氨苄西林、红霉素、克林霉素、复方新诺明、头孢唑啉的耐药率较高，均大于75%；呋喃妥因、利福平、阿米卡星耐药率较低，均小于20%，但是对于肠球菌则不适用，肠球菌耐药率普遍高于葡萄球菌属，其抗菌谱更窄，且高浓度庆大霉素高度耐药，表明庆大霉素联合内酰胺类抗生素无效，对于肠球菌氯霉素耐药率较低，不同的革兰阳性球菌对同一抗生素耐药率不同，因此细菌药敏实验对于临床医生用药参考相当重要，目前我院尚没有发现万古霉素、替考拉宁耐药株，因此糖肽类抗生素仍是革兰阳性球菌感染的首选药物[9-12]。
随着广谱抗菌药物的广泛应用，病原菌的种类和耐药性不断变化，即使在同一地区、不同医院、细菌的变化都有差异，因此，临床医生一定要参考本医院近期细菌对抗生素测定结果选择用药，严格把关，合理规范使用抗生素，避免细菌多重耐药株的产生，以减少因不合理用药给患者和社会带来危害。
[参考文献]
[1] 倪语星，尚红. 临床微生物学检验基础[M]. 第5版. 北京：人民卫生出版社，2012，5（1）：29.
[2] 夏敏. 尿液培养检出细菌的分布于耐药性分析[J]. 右江民族医学院学报，2010，2（2）：222-224.
[3] 宋贤响，田礼军，邹华新，等. 某院尿液培养病原菌的分布及药敏结果分析[J]. 检验医学与临床，2011，20（8）：2448-2449.
[4] 熊祝嘉，岳志刚，李小瑛，等. 尿路感染患者病原菌分布及耐药性研究[J]. 中华实用诊断与治疗杂志，2011，25（9）：933-934.
[5] 邱令法，裴碧娜. 广谱β内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测和耐药性分析[J]. 检验医学，2012，27（5）：421-423.
[6] 王风莲，杨志明，张永鹏. 大肠埃希菌耐药性检测及临床意义[J]. 中国医学创新，2013，10（6）：136-137.
[7] 蔡利红. 168例小儿清洁中段尿培养阳性标本的病原菌谱及耐药性分析[J]. 中国实用医刊，2012，39（1）：79-80.
[8] 吴泽才，吴少群，向成玉. 2006～2010年尿路感染病原菌分布及耐药性分析[J]. 中华医院感染学杂志，2012，22（6）：1296-1299.
[9] 李三中，王刚. 葡萄球菌属感染分布与耐药性分析[J]. 中华医院感染学杂志，2010，20（19）：3045-3046.
[10] 杨辉云. 耐苯唑西林凝固酶阴性葡萄球菌的检测[J].中华医学检验杂志，2011，8（3）：33-34.
[11] 范昊，程君. 113株表皮葡萄球菌耐药性监测与分析[J].安徽医学，2011，15（3）：14-16.
[12] 邱卫强. 我院2011-2013年病原菌的菌群分布特点与耐药分析[J]. 实用检验医学，2014，2（3）：32-35.
（收稿日期：2014-07-31）
[关键词] 尿液培养； 病原菌； 耐药性 ；革兰阳性球菌；革兰阴性杆菌
[中图分类号] R446.5 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2015）01-0061-03
Urinary tract infection pathogen distribution and resistance analysis
ZHANG Zhimin1 QIU Weiqiang1 WANG Rui2
1.Clinical Laboratory， the Center Hospital in Zhumadian City，Zhumadian 463000，China；2.Clinical Laboratory， Zhumadian Hospital of TCM，Zhumadian 463000，China
[Abstract] Objective To understand the hospital urinary tract infection pathogenic bacteria distribution and drug resistance change trend and provide laboratory reference for clinical medication. Methods Bacteria in VITEK2-compact automatic analyzer， susceptibility and K-B method according to the latest version of NCCLS fold point in our hospital from 2011 to 2013 patients with diagnosis of urinary tract infection were midway through 10049 urine specimens for testing. Results 3187 strains pathogenic bacteria were detected of 10049 urine specimens， separation of positive rate was 31.7%， the main pathogen detection sequence was e.coli 1107（34.7%）， coagulase negative staphylococcus 379（11.9%） genera and 275（8.63%）， klebsiella pneumoniae（7.34%） of 234. Enterobacteriaceae bacteria of piperacillin his temple and hydrocarbon enzyme alkenes antibiotics imine southern culture， beauty culture south resistance is low， did not find to sugar peptide antibiotics were gram positive coccus vancomycin resistant strains and their stead ning. Conclusion Urinary tract infection pathogens is given priority to with gram-negative bacterium escherichia athey bacteria， bacterial resistance to commonly used antimicrobial agents is higher. Laboratory shall regularly monitor the region the main pathogenic bacteria of urinary tract infection and their resistance to change， and to provide reference for reasonable selection of antibiotics.
[Key words] Urine culture； Pathogenic bacteria； Drug resistance；Gram positive coccus；Gram negative bacilli
泌尿系感染（UTI）是指大量微生物在尿路中生长繁殖而引起的尿路炎症，可分为上尿路感染和下尿路感染，多见于成年女性，为最常见的感染性疾病[1]。尿液细菌培养是诊断UTI的金标准，药物敏感性试验对于UTI的治疗有指导作用，为了更加详细地了解UTI病原菌的分布与耐药情况，为临床合理选择抗生素提供实验室依据，减轻患者负担，提高治疗效果，延缓耐药株的产生，现将我院2011年1月1日～2013年12月31日确诊UTI患者的中段尿液培养检出病原菌的分布和药物敏感性试验结果进行分析，现报道如下。 1 资料与方法
1.1 一般资料
收集我院住院患者2011年1月1日～2013年12月31日送检的10049份尿液标本培养，分离病原菌。同一患者连续多次分离的相同菌株，取首次分离菌株，去除重复菌株。
1.2方法
1.2.1 标本采集与阳性判断标准 嘱患者在清洗外阴后，无菌条件下留取中段尿液标本及时送检，选择患者的尿液两份作为实验样品，一份做普通琼脂平板菌落计数，另一份取10 μL分别接种于血平板和中国蓝平板上，放置在37℃的温箱中培养18～24 h后观察细菌菌落形态分布，24 h无细菌生长者继续放置到48 h，如仍无细菌生长报阴性。尿路感染的判定的标准分为两种情况；①革兰阳性球菌菌落数≥104 cfu/mL；②革兰阴性杆菌菌落数≥105 cfu/mL。
1.2.2 鉴定和药敏方法 按全国临床检验操作规程，采用法国梅里埃的VITEK2-Compact全自动细菌鉴定仪对细菌鉴定和药敏试验，药敏试验同时兼做K-B法，根据美国临床实验室标准化研究所（CLSI）最新版本规定的折点进行结果判断。所用纸片均用卫生部临床检验中心提供的大肠埃希菌ATC25922，金黄色葡萄球菌ATC29213、铜绿假单胞菌ATC27853、粪肠球菌ATC 29212质控，上机鉴定和药敏板用大肠埃希菌ATC25922，金黄色葡萄球菌ATC29213质控。
1.3 统计学方法
所有数据采用世界卫生组织推荐的WHONET8.4软件进行处理。
2 结果
2.1 菌种的分布
10049例尿路感染患者的中断尿培养共分离病原菌3187株，检出阳性率31.7%，这与有关报道相似[2，3]。其中革兰阴性杆菌1769株，占55.5%；革兰阳性菌707株，占22.1%；真菌711株，占22.3%。排名前四位的细菌依次是大肠埃希菌1107株，占34.7%；凝固酶阴性葡萄球菌 379株，占11.9%；肠球菌属275株，占8.63%；肺炎克雷伯菌234株，占7.34%；3187株病原菌菌种分布见表1。
2.2 常见革兰阳性病原菌对所测抗菌药物的耐药性
707株革兰阳性球菌对常用抗菌药物如青霉素类、头孢类、大环内酯类、磺胺类、克林霉素类、喹诺酮类均有不同程度的耐药，但没有发现万古霉素、替考拉宁耐药株，主要革兰阳性菌对常用抗菌药物的药敏结果见表2。
2.3常见革兰阴性病原菌对所测抗菌药物的耐药性
1769株革兰阴性杆菌对所测抗菌药物的耐药性见表2。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、变形杆菌耐药性前8位的是氨苄西林、头孢唑啉、哌拉西林、复方新诺明、左氧氟沙星、呋喃妥因、氨苄西林他唑巴坦、氨曲南，对碳氢酶烯类抗生素耐药率最低。
3讨论
UTI是由多种病原微生物和寄生虫感染所致的疾病，细菌感染引起的UTI占绝大部分，而又以革兰阴性菌引起的感染最多[4]。这与本次结果相似，我们医院引起UTI的菌群中，革兰阴性杆菌1769株，占55.5%，革兰阴性菌又以大肠埃希菌为主，占34.7%；阳性菌以凝固酶阴性葡萄球菌为主，占11.9%，大肠埃希菌极易引起UTI，一是因为大肠埃希菌是肠道正常菌群，由于生理性特点，离泌尿道口较近，易污染泌尿道；二是因为尿道上皮细胞表面的甘露糖受体可与大肠埃希菌的纤毛结合，从而增加了感染机会[5，6]。
革兰阴性杆菌引起的感染中，大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、变形杆菌对氨苄西林、头孢唑啉、复方新诺明、呋喃妥因耐药率较高，均大于70%；对头孢他啶、头孢吡肟、头孢替坦、米诺环素呈现轻度耐药，在20%～40%之间；而对哌拉西林他唑巴坦、阿米卡星耐药绿较低，在10%～20%之间，碳青酶烯类抗生素亚胺培南、美罗培南耐药率较低，小于10%，碳氢酶烯类抗生素是革兰阴性杆菌感染的顶级抗生素，有些文章建议为首选抗生素[7]，但是由于碳氢酶烯类抗菌谱广，易导致菌群失调引起真菌二重感染，且为临床第三类药，临床易慎用[8]于革兰阴性杆菌。就抗菌药物整体而言，变形杆菌属对抗菌药物较为敏感，因此细菌药敏实验对于临床选择用药十分重要。
在革兰阳性葡萄球菌属引起的感染中，青霉素、氨苄西林、红霉素、克林霉素、复方新诺明、头孢唑啉的耐药率较高，均大于75%；呋喃妥因、利福平、阿米卡星耐药率较低，均小于20%，但是对于肠球菌则不适用，肠球菌耐药率普遍高于葡萄球菌属，其抗菌谱更窄，且高浓度庆大霉素高度耐药，表明庆大霉素联合内酰胺类抗生素无效，对于肠球菌氯霉素耐药率较低，不同的革兰阳性球菌对同一抗生素耐药率不同，因此细菌药敏实验对于临床医生用药参考相当重要，目前我院尚没有发现万古霉素、替考拉宁耐药株，因此糖肽类抗生素仍是革兰阳性球菌感染的首选药物[9-12]。
随着广谱抗菌药物的广泛应用，病原菌的种类和耐药性不断变化，即使在同一地区、不同医院、细菌的变化都有差异，因此，临床医生一定要参考本医院近期细菌对抗生素测定结果选择用药，严格把关，合理规范使用抗生素，避免细菌多重耐药株的产生，以减少因不合理用药给患者和社会带来危害。
[参考文献]
[1] 倪语星，尚红. 临床微生物学检验基础[M]. 第5版. 北京：人民卫生出版社，2012，5（1）：29.
[2] 夏敏. 尿液培养检出细菌的分布于耐药性分析[J]. 右江民族医学院学报，2010，2（2）：222-224.
[3] 宋贤响，田礼军，邹华新，等. 某院尿液培养病原菌的分布及药敏结果分析[J]. 检验医学与临床，2011，20（8）：2448-2449.
[4] 熊祝嘉，岳志刚，李小瑛，等. 尿路感染患者病原菌分布及耐药性研究[J]. 中华实用诊断与治疗杂志，2011，25（9）：933-934.
[5] 邱令法，裴碧娜. 广谱β内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测和耐药性分析[J]. 检验医学，2012，27（5）：421-423.
[6] 王风莲，杨志明，张永鹏. 大肠埃希菌耐药性检测及临床意义[J]. 中国医学创新，2013，10（6）：136-137.
[7] 蔡利红. 168例小儿清洁中段尿培养阳性标本的病原菌谱及耐药性分析[J]. 中国实用医刊，2012，39（1）：79-80.
[8] 吴泽才，吴少群，向成玉. 2006～2010年尿路感染病原菌分布及耐药性分析[J]. 中华医院感染学杂志，2012，22（6）：1296-1299.
[9] 李三中，王刚. 葡萄球菌属感染分布与耐药性分析[J]. 中华医院感染学杂志，2010，20（19）：3045-3046.
[10] 杨辉云. 耐苯唑西林凝固酶阴性葡萄球菌的检测[J].中华医学检验杂志，2011，8（3）：33-34.
[11] 范昊，程君. 113株表皮葡萄球菌耐药性监测与分析[J].安徽医学，2011，15（3）：14-16.
[12] 邱卫强. 我院2011-2013年病原菌的菌群分布特点与耐药分析[J]. 实用检验医学，2014，2（3）：32-35.
（收稿日期：2014-07-31）