【摘 要】
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目的应用人重组CD40L(r-CD40L)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤,研究该损伤对人脐间充质干细胞(UC-MSCs)趋化作用的影响。方法培养HUVEC,采用不同浓度r-CD40L刺激HUVEC 24 h
【机 构】
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河北医科大学第四医院妇产科,邯郸市永年第一医院妇产科,石家庄市元氏县医院妇产科
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目的应用人重组CD40L(r-CD40L)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤,研究该损伤对人脐间充质干细胞(UC-MSCs)趋化作用的影响。方法培养HUVEC,采用不同浓度r-CD40L刺激HUVEC 24 h,应用Transwel(l滤膜直径6.5 mm,孔径0.4μm)技术建立内皮细胞通透模型并计算通透系数;培养HUVEC,采用不同浓度r-CD40L刺激HUVEC 24 h,将干预后4组细胞经处理后取上清置入EP管,离心后加入Transwel(l滤膜直径6.5 mm,孔径8μm)小室下室,将第5代UC-MSCs用含5%FBS的培养基调整细胞浓度为1×105/mL,接种到预处理后的Transwell小室的上室,5%CO237°C,培养24 h,取出后用1%结晶紫染色,200倍镜下随机计数6个无重叠细胞视野的透膜细胞数,取平均数代表该组细胞的侵袭能力。结果随着r-CD40L刺激浓度的增加,内皮细胞通透系数逐渐升高;不同浓度r-CD40L(0、20、30、40μg/L)刺激HUVEC 24 h后,损伤的内皮细胞诱导UC-MSCs透膜细胞个数分别为10.00±1.76、25.96±2.84、37.88±3.23、49.04±2.81,组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论 sCD40L能诱导内皮细胞损伤;并且随着内皮细胞损伤程度的增加对人脐间充质干细胞的趋化性增强。
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