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【摘 要】 蛋白质是生命的物质基础，饲料中蛋白质测定的准确性在饲料应用中有极其重要的作用。
【关键词】 蛋白质 测定 意义
【DOI编码】 10.3969/j.issn.1674-4977.2016.01.004
蛋白质是复杂的含氮有机化合物，动物在成长过程中所需要的蛋白质营养成分多少决定其生长的质量，所以真蛋白质含量测定的准确性直接影响饲料的质量和动物的成长。
饲料原料的种类很多，有动物蛋白饮料和植物蛋白饮料，饲料中蛋白质含量是判定饲料营养价值的一项重要指标。饲料中粗蛋白质包括真蛋白质和非蛋白质两部分含氮物质，后者主要包括游离氨基酸、硝酸盐、氨等，在饲料生产中添加羽毛粉、血粉、尿素等不易被动物肌体吸收的物质，饲料产品中粗蛋白含量上去了，但却没有相应的营养价值，造成养殖效益的低下，所以检测饲料中真蛋白含量的意义重大。
近年来，在国内外测定饲料中蛋白质含量的方法很多，但是应用广泛的分析方法中主要采用凯氏定氮法。凯氏定氮法由Kieldahl于1833年首先提出，经长期改进，迄今已发展的非常完善及准确，其中自动定氮仪法采用较广泛。
1 原理
真蛋白的检测原理是将20%硫酸铜加入已溶解的饲料原料中，加入过程中要缓慢且过量，这样才能使饲料中的真蛋白在碱性条件下被氢氧化铜沉淀出来，为了防止水溶性含氮物的干扰，还要用蒸馏水将其洗净，此时的沉淀物可按饲料中粗蛋白的检测方法将真蛋白质的含量测定出来。
蛋白质是有机化合物，将饲料原料与硫酸和催化剂一起在高温炉上加热，将其中的蛋白质充分分解出来，分解出来的氨与硫酸产生碳酸铵，最后再加入过量的碱溶液，在蒸馏过程中使其中的氨游离，在硼酸吸收液接收后用标准盐酸溶液滴定，根据酸的消耗量计算其中蛋白质的含量。
2 样品消化
（1）消化反应方程式
H2SO4+2NH3=（NH4）2SO4
加入硫酸钾可提高溶液的沸点，进而加快有机物的分解。
K2SO4+H2SO4=2KHSO4
加入硫酸铜起到催化的作用
Cu2SO4+2H2SO4→2CuSO4+2H2O+SO2↑
（2）蒸馏
氨是否完全蒸馏出来，是决定最后滴定的准确性一步，可将蒸馏液用pH试纸来定性是否为碱性。放出氨气，吸收、滴定。
2NaOH+（NH4）2SO4=2NH3↑+Na2SO4+2H2O
（NH4）2B4O7+5H2O+2HCl=2NH4Cl+4H3BO3
3 操作方法
（1）准确称取饲料原料样品1g～2g（精确到0.1mg），将烧杯中加入50ml无氮蒸馏水，称取准确的样品放入烧杯中，放在电炉上一边加热一边搅拌，缓慢加入硫酸铜溶液至沸腾，再缓慢加入氢氧化钠溶液一起搅拌均匀，将此溶液静止放置2小时以上，将滤纸放于漏斗上，用蒸馏水洗净沉淀物及残渣，使滤纸上的沉淀物无硫酸根离子。连同漏斗一起放入80℃干燥箱中烘干，将滤纸和沉淀物小心放入消化管中加入6.4g催化剂、15ml浓硫酸，在消化器上消化，样液澄清后继续消煮2h，同时做空白实验。
（2）取下消化管，用少量蒸馏水洗净管口，放置到自动凯氏定氮仪上，连接加碱电钮，将硼酸吸收液中放入几滴指示剂摇匀后放置在蒸馏器出口处，使蒸馏口完全浸入吸收液中。自动蒸馏过程中注意蒸馏加碱反应速度，碱液不易过浓，蒸馏速度不易太快，防止消化液逆流到废液桶里。蒸馏液蒸馏过程中轻摇混匀后，将三角瓶离开蒸馏口中，用蒸馏水少量清洗冷凝管末端，继续蒸馏至150ml左右，蒸馏结束。
（3）试样滴定：将蒸馏液摇匀后用盐酸标准溶液滴定，滴定终点由灰蓝色变成蓝紫色。
（4）结果计算：
真蛋白（%）=（V2-V1）×C×0.0140×6.25×100/M
表1为饲料原料鱼粉中真蛋白测定结果，用来鉴别掺假鱼粉。
4 结论
鱼粉中真蛋白与粗蛋白的比列为80%，国产鱼粉中真蛋白与粗蛋白的比列为75%。饲料中蛋白质含量的多少直接影响动物在喂养过程中蛋白质营养成分的摄取，所以在饲料及其原料的蛋白质检测过程中，对于每一个检测环节都应严谨认真，使检测的蛋白含量准确无误，为动物饲料的鉴定和定量起到一定指导分析作用。
作者简介
辛欣，从事食品检验工作11年，现任锦州市产品质量监督检验所样品室主任。
（责任编辑：张晓明）
【关键词】 蛋白质 测定 意义
【DOI编码】 10.3969/j.issn.1674-4977.2016.01.004
蛋白质是复杂的含氮有机化合物，动物在成长过程中所需要的蛋白质营养成分多少决定其生长的质量，所以真蛋白质含量测定的准确性直接影响饲料的质量和动物的成长。
饲料原料的种类很多，有动物蛋白饮料和植物蛋白饮料，饲料中蛋白质含量是判定饲料营养价值的一项重要指标。饲料中粗蛋白质包括真蛋白质和非蛋白质两部分含氮物质，后者主要包括游离氨基酸、硝酸盐、氨等，在饲料生产中添加羽毛粉、血粉、尿素等不易被动物肌体吸收的物质，饲料产品中粗蛋白含量上去了，但却没有相应的营养价值，造成养殖效益的低下，所以检测饲料中真蛋白含量的意义重大。
近年来，在国内外测定饲料中蛋白质含量的方法很多，但是应用广泛的分析方法中主要采用凯氏定氮法。凯氏定氮法由Kieldahl于1833年首先提出，经长期改进，迄今已发展的非常完善及准确，其中自动定氮仪法采用较广泛。
1 原理
真蛋白的检测原理是将20%硫酸铜加入已溶解的饲料原料中，加入过程中要缓慢且过量，这样才能使饲料中的真蛋白在碱性条件下被氢氧化铜沉淀出来，为了防止水溶性含氮物的干扰，还要用蒸馏水将其洗净，此时的沉淀物可按饲料中粗蛋白的检测方法将真蛋白质的含量测定出来。
蛋白质是有机化合物，将饲料原料与硫酸和催化剂一起在高温炉上加热，将其中的蛋白质充分分解出来，分解出来的氨与硫酸产生碳酸铵，最后再加入过量的碱溶液，在蒸馏过程中使其中的氨游离，在硼酸吸收液接收后用标准盐酸溶液滴定，根据酸的消耗量计算其中蛋白质的含量。
2 样品消化
（1）消化反应方程式
H2SO4+2NH3=（NH4）2SO4
加入硫酸钾可提高溶液的沸点，进而加快有机物的分解。
K2SO4+H2SO4=2KHSO4
加入硫酸铜起到催化的作用
Cu2SO4+2H2SO4→2CuSO4+2H2O+SO2↑
（2）蒸馏
氨是否完全蒸馏出来，是决定最后滴定的准确性一步，可将蒸馏液用pH试纸来定性是否为碱性。放出氨气，吸收、滴定。
2NaOH+（NH4）2SO4=2NH3↑+Na2SO4+2H2O
（NH4）2B4O7+5H2O+2HCl=2NH4Cl+4H3BO3
3 操作方法
（1）准确称取饲料原料样品1g～2g（精确到0.1mg），将烧杯中加入50ml无氮蒸馏水，称取准确的样品放入烧杯中，放在电炉上一边加热一边搅拌，缓慢加入硫酸铜溶液至沸腾，再缓慢加入氢氧化钠溶液一起搅拌均匀，将此溶液静止放置2小时以上，将滤纸放于漏斗上，用蒸馏水洗净沉淀物及残渣，使滤纸上的沉淀物无硫酸根离子。连同漏斗一起放入80℃干燥箱中烘干，将滤纸和沉淀物小心放入消化管中加入6.4g催化剂、15ml浓硫酸，在消化器上消化，样液澄清后继续消煮2h，同时做空白实验。
（2）取下消化管，用少量蒸馏水洗净管口，放置到自动凯氏定氮仪上，连接加碱电钮，将硼酸吸收液中放入几滴指示剂摇匀后放置在蒸馏器出口处，使蒸馏口完全浸入吸收液中。自动蒸馏过程中注意蒸馏加碱反应速度，碱液不易过浓，蒸馏速度不易太快，防止消化液逆流到废液桶里。蒸馏液蒸馏过程中轻摇混匀后，将三角瓶离开蒸馏口中，用蒸馏水少量清洗冷凝管末端，继续蒸馏至150ml左右，蒸馏结束。
（3）试样滴定：将蒸馏液摇匀后用盐酸标准溶液滴定，滴定终点由灰蓝色变成蓝紫色。
（4）结果计算：
真蛋白（%）=（V2-V1）×C×0.0140×6.25×100/M
表1为饲料原料鱼粉中真蛋白测定结果，用来鉴别掺假鱼粉。
4 结论
鱼粉中真蛋白与粗蛋白的比列为80%，国产鱼粉中真蛋白与粗蛋白的比列为75%。饲料中蛋白质含量的多少直接影响动物在喂养过程中蛋白质营养成分的摄取，所以在饲料及其原料的蛋白质检测过程中，对于每一个检测环节都应严谨认真，使检测的蛋白含量准确无误，为动物饲料的鉴定和定量起到一定指导分析作用。
作者简介
辛欣，从事食品检验工作11年，现任锦州市产品质量监督检验所样品室主任。
（责任编辑：张晓明）