【摘 要】
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家蚕30K蛋白是家蚕生长发育的主要能源物质,具有多种生物学功能.根据已知的30K蛋白的氨基酸序列,利用NCBI在线BLAST程序在家蚕蛋白质数据库中进行氨基酸序列相似性比对分析,
【机 构】
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浙江理工大学生物化学研究所,杭州310018;浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室,杭州310018
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家蚕30K蛋白是家蚕生长发育的主要能源物质,具有多种生物学功能.根据已知的30K蛋白的氨基酸序列,利用NCBI在线BLAST程序在家蚕蛋白质数据库中进行氨基酸序列相似性比对分析,发现一条新的氨基酸序列,命名为Slp蛋白(GenBank登录号:NM_001126256).该蛋白质与已知的5种家蚕30K蛋白的氨基酸序列相似度达41％以上,且具有共同的保守结构域Lipoprotein_11,三级结构也极其相似,推测Slp蛋白可能是家蚕30K蛋白家族新成员.利用NCBI在线工具查找获得了编码Slp的基因序列,然后利用RT-PCR技术从家蚕5龄幼虫脂肪体中克隆得到Slp的cDNA序列,并在大肠杆菌中诱导表达.利用获得的纯化Slp蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,对该蛋白质进行亚细胞定位的结果显示其主要存在于BmN细胞的细胞膜上和细胞质中.Western blotting检测Slp蛋白在家蚕不同发育时期均有表达,以5龄幼虫期的表达量最高,蛹期次之,蛾期和卵期最低；在5龄幼虫不同组织均有表达,以血淋巴和脂肪体中的表达量最高,在其它组织中的表达量较低.依据Slp蛋白的序列结构与表达特征,推测其与已知的家蚕30K蛋白具有相似的多种生物学功能.
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