杆状病毒包涵体蛋白的共同抗原性研究及重组病毒的构建

来源 :中国科学院武汉病毒研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ahhshpl
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
杆状病毒,包括核多角体病毒( Nucleopolyhedravirus,NPV)和颗粒体病毒(Granulovirus,GV),是多种农业、蔬菜、森林和牧场害虫的病原体,已经有多种杆状病毒被开发为商业化的生物杀虫剂。本论文研究了杆状病毒包涵体蛋白之间的共同抗原性,为利用免疫层析技术快速检测不同种类杆状病毒的浓度打下了基础。另外,作者还构建了含舞毒蛾(Lymantria dispar)核多角体病毒(LdNPV)的增效蛋白基因的重组苜蓿银纹夜蛾(Autographa californica)核多角体病毒( AcNPV),以期增强杆状病毒的杀虫活性。   本论文分三章。   第一章:文献综述。由三个部分组成:第一部分概括介绍了杆状病毒生物学、分子生物学研究进展和应用研究情况;第二部分介绍了杆状病毒增效蛋白的发现、特性以及应用;最后介绍了本论文的目的和意义。   第二章:对多种杆状病毒包涵体蛋白之间的血清学关系进行了研究。在比对已公布的37种杆状病毒包涵体蛋白氨基酸序列的基础上,选定棉铃虫(Helicoverpaarmigera)核多角体病毒(HaNPV)多角体蛋白的两个高度保守多肽(54-113 aa和206-245 aa)制备了多克隆抗体,并用Western blot法检测这两个高度保守多肽与多种杆状病毒包涵体蛋白之间的血清学关系。结果表明,HaNPV多角体蛋白两个多肽的抗体与14种NPV的多角体蛋白及5种GV的颗粒体蛋白均有明显的杂交信号,表明杆状病毒的包涵体蛋白之间具有共同的抗原决定簇。根据杆状病毒包涵体蛋白之间的这种血清学关系,讨论了利用免疫金试纸技术检测病毒杀虫剂中包涵体含量的可行性。   第三章:已经在多种杆状病毒中鉴定了编码增效蛋白( Enhancin)的基因。增效蛋白是一种金属蛋白酶,能够增强杆状病毒和苏云金芽孢杆菌对鳞翅目昆虫的感染性。作者将LdNPV的Enhancin1基因克隆于原核表达载体上,在大肠杆菌BL21菌株中进行了表达,免疫家兔制备了多克隆抗体。同时,利用AcNPV的Bac-to-Bac系统,将LdNPV Enhancin1基因插入苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒(Autographacalifornica nucleopolyhedrovirus,AcNPV)基因组中,并让Enhancin的N端分别与松毛虫质型多角体病毒的VP3 N端的79 aa片段和AcNPV ODV-E66 N端的23 aa片段融合,将增效蛋白包装到包涵体或者ODV的囊膜上,构建重组AcNPV,以期增强病毒的杀虫活性。
其他文献
Wnt/β-catenin信号通路是多细胞生物中一条保守的信号通路,它在胚胎体轴建立、器官发生、组织再生以及各种疾病的产生中都具有重要的意义。 本文以非洲爪蟾胚胎发育为模型
随着信息产业的不断发展,数据速率越来越高,在传输过程中数据信号发生衰减和失真,为了减小误码率,需要一个稳定的时钟信号来重新定时数据信号,减小抖动和干扰。因此,时钟恢复
投资者赔偿政策是证券投资者保护基金制度的核心内容,关系到投资者的切身利益和保护基金制度设立的意义。随着投资者保护基金的设立,我国已经初步建立了市场化的投资者赔偿政
种子贮藏蛋白是种子贮藏物质的主要类型之一,其含量是评估种子品质的重要指标。种子贮藏蛋白的积累受到复杂而精细的调控,而植物激素在这一重要的生物学过程的角色与功能仍有待
二氧化碳(CO2)是空气中的重要组分,它是主要的温室效应气体。对于许多生物而言,CO2又是一种重要的环境信号分子。传统上,CO2被认为是无色无味的气体,经典的心理物理学测试证明低
SUMO化修饰是一个共价结合到各种各样的目的蛋白的翻译后修饰。与泛素化一样,SUMO化修饰需要经过一系列的酶催化反应来完成修饰,最后在特异性的歧化酶的作用下去SUMO化。与泛素
氮肥的大量使用和使用不当对生态环境造成了严重的污染,我国每年有123.5万吨氮通过地表水泾流到江河湖泊,49.4万吨进入地下水,299万吨进入大气。氮素经径流、淋洗等途径进入水体
油桐(Vernicia fordii Hemsley)为大戟科(Euphorbiaceae)油桐属(VerniciaL.)落叶乔木,是我国特有的经济树种。油桐种子含油率达50%-70%,其中约94%为不饱和脂肪酸,是发展生物柴油的
随着通信技术和消费类电子产品的发展,模数转换器在数字集成电路与模拟集成电路之间的作用更加明显,其广泛应用于数字视频、CCD成像、数字接收等领域。采样保持电路是流水线A
弹性分组环(RPR)技术是由美国电气和电子工程师协会( IEEE)提出的一种基于分组交换的媒体接入控制层(MAC)协议,具有带宽共享、公平机制、倒换保护、业务等级分配等功能。但标