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本课题利用化学-酶法制备巴氯芬和普瑞巴林。通过苯酚-次氯酸钠法对实验室保藏的80株腈水解酶菌株进行筛选得到高产腈水解酶的真菌菌株WX12，并生物催化3-(4-氯苯基)-戊二腈和3-异丁基戊二腈分别制备巴氯芬和普瑞巴林关键手性中间体(S)-4-氰基-3-(4-氯苯基)-丁酸和(R)-3-氰基甲基-5-甲基己酸，并在此基础上，通过化学法合成光学纯的巴氯芬和普瑞巴林。以3-(4-氯苯基)-戊二腈和3-异丁基戊二腈为底物，对实验室保藏的腈水解酶菌株进行筛选，得到一株产物立体选择性较高的赤霉菌Gibberella intermedia WX12，并对其催化特性和发酵条件进行了初步研究。以30g/L的乳糖和20g/L的蛋白胨分别为碳、氮源，发酵培养96h，收集的菌体在50mmol/L磷酸缓冲液（pH8.0）中30℃催化3-(4-氯苯基)-戊二腈转化为4-氰基-3-(4-氯苯基)-丁酸，酶活可达49.6U/g，反应24h产率为90%。同等发酵和转化条件下，以3-异丁基戊二腈为底物，转化反应72h产率也能达到90%。对水解产物进行核磁鉴定（NMR）和高效液相色谱(HPLC)检测，再经霍夫曼重排生成巴氯芬和普瑞巴林，手性HPLC分析表明，水解产物构型是(S)-巴氯芬和(R)-普瑞巴林，且两者的对映异构体过量值（ee值）均大于99％。该产物可用于合成光学纯的(R)-/(S)-巴氯芬和(R)-/(S)-普瑞巴林。以重组质粒pET28a(+)-Nit构建工程菌E.coli BL21(DE3)/pET28a(+)-Nit，与野生菌株G. intermedia相比，两者转化24h后的转化率（90%）和对映异构体过量值（﹥99%）均相似；与实验室原有的腈水解酶工程菌bll6402相比，转化率略低（90%，bll6402为100%），ee值（﹥99%）则优于bll6402（92%）。