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氯霉素是一种广谱抗生素,但是它的使用会产生严重的副作用,它能抑制骨髓的造血功能,引起致命的再生障碍性贫血。目前,我国已经禁止氯霉素的使用,但是在畜牧业以及水产品养殖业中仍有人使用氯霉素。因此,氯霉素是国家食品安全检测中规定的必检药品。然而,现有的氯霉素检测方法选择性不够好或者操作麻烦并且成本昂贵(如液-质联用色谱分析法)。所以,寻求一种高灵敏度、高选择性、操作方便的氯霉素检测方法具有十分重要的意义。分子印迹作为一种高选择性技术有望解决上述问题。
本论文利用悬浮聚合法制备了高选择性、高吸附容量的氯霉素分子印迹微球。结果表明,以150mL的1.5%PVA水溶液(w)作为水相,CAP(0.646g)、MAA(0.344 g)、EDMA(7.92 g)、EA(12mL)和AIBN(O.1 g)的混合液作为油相,采用变温聚合,即先以60℃聚合4小时,接着再将温度升至75℃反应4小时,可制得平均粒径为60um、Span值为0.8、孔径为4nm、比表面积约为300m2/g的微球,该微球对氯霉素具有高效的选择性和识别性,在20%的乙醇/水中其吸附容量高达66.64 mg/g。将氯霉素印迹微球采用匀浆法填装进入不锈钢色谱柱,高效液相色谱法分析表明,该色谱柱不仅能有效地分离氯霉素与其结构类似物甲砜霉素、氟甲砜霉素,而且还能实现氯霉素与四环素、红霉素的良好分离。此外,色谱柱对氯霉素的检测限也大大提高,可以检测到0.02μg/mL的氯霉素溶液。
此外,本论文利用微流控芯片获得了粒径均一、可控的O/W乳滴,该乳滴经过固化后便可得到分子印迹微球。在研究过程中发现,固定分散相流速不变,当液体成球稳定后,形成乳滴的粒径随着连续相流速的增加而减小,但是增大到一定值后,乳滴的粒径变化趋于平缓;固定连续相与分散相的流速比,同时改变两者的流速,形成乳滴的粒径变化不明显。利用微流控芯片试验时,由于芯片材料以及试验试剂的亲疏水性不同,乳滴可以在微通道中的不同位置形成:一种是在两相管道交叉口处,另一种是在交叉口下游不远处形成乳滴。该研究成果为进-步用微流控装置制备氯霉素分子印迹微球及其他兽药分子印迹微球奠定了基础。