杜仲叶中绿原酸和芦丁的提取分离及纯化

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本论文是以杜仲叶为研究对象,采用高效液相色谱建立同时测定杜仲叶中绿原酸和芦丁含量的方法;借助响应曲面试验设计,研究绿原酸和芦丁的离子液体微波辅助提取工艺;运用扫描电子显微镜观察杜仲叶提取前后细胞的微观结构变化,分析离子液体微波辅助强化传质机理;借助正交试验设计,优化了绿原酸和芦丁的大孔吸附树脂纯化工艺。本文的主要研究结果如下:1、建立了杜仲叶中绿原酸和芦丁含量的高效液相色谱同时测定的方法。在该色谱条件下,绿原酸和芦丁基线分离良好。绿原酸的线性方程为Y=1306941.7367X-13775.0000,R2=0.9997;芦丁的线性方程为Y=2171691.9861X+42213.0000,R2=0.9995,精密度、稳定性、重复性、回收率试验表明该方法切实可行。2、优化了杜仲叶中绿原酸和芦丁的离子液体微波辅助提取工艺。合成了[Bmim]Cl、[Bmim]Br、[Bmim]BF4三种离子液体,并进行了IR分析。从这三种离子液体中筛选出了[Bmim]Cl是绿原酸和芦丁的良好提取溶剂。响应曲面设计优化的[Bmim]Cl离子液体微波辅助提取绿原酸和芦丁的适宜工艺条件为:离子液体浓度2mo1/L、液固比15:1,微波温度50℃,微波时间10min,该条件下绿原酸和芦丁平均得率分别是1.58%和0.206%。同时与乙醇回流提取法及微波辅助提取法进行比较,得出离子液体微波辅助提取绿原酸和芦丁的得率比乙醇回流提取分别高19.7%和164.1%,比微波辅助提取分别高23.4%和216.9%。说明离子液体微波辅助提取得率高,具有明显的优势。通过扫描电子显微镜观察杜仲叶提取前后细胞的微观结构变化,分析离子液体微波辅助强化传质机理,结果表明:不同提取方法对杜仲叶细胞组织的影响程度明显不同,离子液体微波辅助提取法使杜仲叶细胞易出现裂缝、破碎,降低了传质阻力,更有利于提取。3、研究了杜仲叶中绿原酸和芦丁的大孔吸附树脂纯化工艺。通过吸附树脂的静态吸附解吸试验,筛选出S-8型树脂为较优的吸附材料。正交试验优化绿原酸的分离纯化工艺为:50%乙醇解吸剂用量300mL、解吸剂流速3.0mL/min、上柱液pH值1.0,该条件下得到初步纯化的绿原酸的纯度达到78.42%;正交试验优化芦丁的分离纯化工艺为:70%乙醇解吸剂用量300mL、解吸剂流速2.0mL/min、上柱液pH值5.0,该条件下得到初步纯化的芦丁的纯度达到56.41%。本论文的研究建立了HPLC法同时测定绿原酸和芦丁含量;优化了离子液体微波辅助提取杜仲叶中绿原酸和芦丁的提取工艺,为杜仲叶中绿原酸和芦丁样品制备提供了一种新思路;优化了杜仲叶中绿原酸和芦丁的纯化工艺。论文的的研究结果为杜仲叶的质量控制和加工利用提供了可借鉴的基础和依据。
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