循环内皮细胞膜微粒及其中的microRNA-155水平与脑梗死的相关性研究

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【目的】  通 过 检 测 循 环 内 皮 细 胞 膜 微 粒 (EMVs) 及 其 中 的miRNA-155(EMVs-miRNA-155)表达水平变化,探讨两者是否与脑梗死相关。  【方法】  本实验设计采用病例-对照研究,选取脑梗死患者93例,设为脑梗死组。同时选取性别、年龄、种族相匹配的体检者70例,设为对照组。将脑梗死组据NIHSS评分、TOAST分型、梗死体积和病程进一步分组。采用磁珠分选法分离EMVs;纳米技术颗粒分析技术(NTA)检测EMVs水平;RT-PCR技术检测EMVs中的miRNA-155表达水平。统计分析EMVs及EMVs-miRNA-155与上述指标的相关性。将EMVs及EMVs-miRNA-155纳入二分类Logistic回归分析,分析脑梗死发生的危险因素。进一步对EMVs及EMVs-miR-155进行ROC曲线分析,评估其对脑梗死的诊断价值。  【结果】  1. 采用内皮源性的CD105及CD144标记EMVs,采用磁珠分选法成功分离内皮细胞膜微粒(CD105+CD144+EMVs),使用NTA技术检测分析,结果示CD105+CD144+EMVs粒径大小在(100~500)nm之间。  2. 脑梗死组循环 EMVs 及其中的 miRNA-155 水平显著高于对照组(P<0.001;P<0.001)。  3. 中重型脑梗死组EMVs及EMVs-miRNA-155水平显著高于轻型脑梗死组 (P<0.05;P<0.05);相较于对照组,中重型脑梗死组和轻型脑梗死组的EMVs及EMVs-miRNA-155水平均较对照组显著升高(P<0.001,P<0.001;P<0.001, P<0.05)。  4. 大动脉粥样硬化型卒中、心源性栓塞型卒中和小血管病变型卒中的EMVs水平较对照组均显著升高(P<0.001,P<0.01,P<0.01);大动脉粥样硬化型卒中的EMVs-miRNA-155水平较对照组显著升高(P<0.01)。  5. 大体积梗死、中体积梗死、小体积梗死的EMVs水平较对照组均显著升高(P<0.001;P<0.05;P<0.01);大体积梗死EMVs-miRNA-155表达水平较对照组显著升高(P<0.05)。  6. 急性期脑梗死较慢性期脑梗死的 EMVs-miRNA-155 水平显著升高(P<0.05)。急性期、亚急性期脑梗死的EMVs及EMVs-miRNA-155水平较对照组均显著升高(P<0.001,P<0.01;P<0.001,P<0.01)。  7. 进行二分类Logistic回归分析,结果提示:EMVs、EMVs-miRNA-155、收缩压、空腹血糖、脂蛋白、尿酸、同型半胱氨酸是脑梗死的独立危险因素,高密度脂蛋白是脑梗死的保护因素。  8. 循环 EMVs及其中的miRNA-155在脑梗死患者和对照组的ROC曲线下面积AUC分别为0.778和0.851(P<0.05)。  【结论】  1. 脑梗死患者循环CD105+CD144+EMVs水平及其中的miRNA-155表达水平升高,且在急性期、大动脉粥样硬化型、大梗死体积组更明显,具有评估脑梗死神经功能损伤程度的价值。  2. 循环CD105+CD144+EMVs及其中的miRNA-155不仅是脑梗死的独立危险因素,还可能成为脑梗死潜在的生物学标记物,尚需更大样本的研究进行验证。
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