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角膜缘上皮干细胞的损伤或功能紊乱会引起不同程度的角膜缘干细胞缺陷,将导致视力下降、眼睛不适、疼痛和眼表的不稳定,甚至致盲。有研究发现用体外扩增的角膜缘上皮细胞进行移植对治愈角膜缘干细胞缺陷效果明显。本实验的研究目的是评估兔角膜缘上皮细胞在丝素蛋白(SF)和乳酸-己内酯共聚物(P(LLA-CL))复合纳米纤维(SF/P(LLA-CL)薄膜上的黏附、增殖和分化情况,探讨SF/P(LLA-CL)复合纳米纤维薄膜作为组织工程角膜上皮支架材料的可行性。主要研究分为三个部分：通过静电纺丝技术制备了丝素蛋白/P(LLA-CL)共混纳米纤维膜。结果显示：通过SEM发现未处理组的丝素蛋白/P(LLA-CL)纳米纤维的纤维直径值最大,用75%乙醇蒸汽后处理的丝素蛋白/P(LLA-CL)纳米纤维的纤维直径值最小。通过接触角分析,发现乙醇处理组的接触角最大,水蒸气处理组与未处理组、丝素蛋白/P(LLA-CL)(?)内米纤维膜的接触角相似。在目测情况下,所有处理组的丝素蛋白/P(LLA-CL)纳米纤维膜湿态都比干态更透明。通过酶标仪分析,发现所有处理组的丝素蛋白/P(LLA-CL)纳米纤维膜湿态时的透光率都比干态时高。将原代兔角膜缘上皮细胞种植于SF/P(LLA-CL)(?)内米纤维薄膜上进行复合培养。细胞黏附实验和MTT分析发现经水蒸气处理的SF/P(LLA-CL)纳米纤维膜更能促进角膜缘上皮细胞的增殖；细胞活力检测显示细胞在材料上生长良好,未见明显的死细胞,部分区域细胞呈2-层生长；免疫荧光染色表明生长在材料上的兔角膜缘上皮细胞,既有成熟的角膜上皮细胞,还含有角膜上皮干细胞。HE染色发现兔角膜缘上皮细胞在材料可以连续成片生长；扫描电镜显示角膜缘上皮细胞在材料上保持正常上皮细胞的铺路石样形态,黏附生长良好,细胞表面布满微绒毛,细胞间紧密联接。将丝素蛋白/P(LLA-CL)纳米纤维膜植入兔角膜基质内,研究材料的体内相容性。通过裂隙灯观察和HE染色显示丝素蛋白/P(LLA-CL)纳米纤维膜在兔角膜基质内的具有良好的生物相容性,SF/P(LLA-CL)纳米纤维膜是一种良好的组织工程角膜上皮支架材料。