论文部分内容阅读
前言： 树突状细胞(dendritic cells，DC)是指具有典型树突状形态、膜表面高度表达主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex，MHC)Ⅰ类和Ⅱ类分子，能有效摄取、加工、提呈抗原，并能显著刺激初始型T淋巴细胞增殖的一类细胞。作为目前发现的具有相对特异性表面标志的功能最强的专职抗原提呈细胞(antig-en presenting cell，APC)，DC在调节免疫应答过程中起着双重作用，一方面，DC在触发和调节非特异性免疫反应和特异性免疫反应中起关键作用;另一方面，DC也能够调节T细胞反应，产生外周免疫耐受，表现出功能上的高度可塑性。因此，DC是机体免疫反应的始动者，参与机体多种自身免疫性疾病、免疫缺陷病、肿瘤及一些炎症反应的病理过程，在机体抗感染免疫及肿瘤应答免疫中起重要作用。甘草甜素(glyeyrrhizin，GL)是中药甘草的主要成分，是从药用植物甘草根、茎中提取的一种有效活性成分，具有高甜度、低热量、安全无毒的特点，具有免疫调节、抗炎、抗病毒、抗变态反应等作用，现运用于临床各种疾病的治疗，取得了明显确切的疗效。鉴于甘草甜素和树突状细胞在免疫系统中的显著地位，本实验就甘草甜素对小鼠髓系DC2.4细胞株表型及生物学功能的调节作用进行研究，并探讨其免疫刺激功能及机制。 实验方法： 采用本教研室保存并传代的C57/BL-6小鼠髓系DC2.4细胞株及甘草甜素进行实验，复苏培养细胞，应用MTT方法、扫描电镜技术、流式细胞仪检测技术、体外刺激淋巴细胞增殖、酸性磷酸酶活性检测、酶联免疫吸附试验等检测DC2.4细胞表型和生物学功能的各种指标。 实验结果： 1、甘草甜素处理后，DC2.4细胞表面可见很长的突起;而未作处理的细胞（即RPMI1640组）的突起很短甚至没有突起。 2、甘草甜素处理的DC2.4细胞能够上调其表面MHC-Ⅱ、CD86和CD40分子的表达。 3、甘草甜素组DC2.4细胞，与适宜比例的淋巴细胞培养，可促进淋巴细胞的增殖。 4、甘草甜素处理的DC2.4细胞中的酸性磷酸酶活性低于RPMI1640组。 5、甘草甜素处理的DC2.4细胞比未做任何处理的对照组（即RPMI1640组）IL-12分泌量增加。 结论： 1、适宜浓度的甘草甜素能够显著促进DC2.4细胞形态学的成熟。 2、适宜浓度的甘草甜素显著增加DC2.4细胞的MHC-Ⅱ，CD40和CD86分子的表达，刺激DC2.4细胞发成熟。 3、适宜浓度的甘草甜素作用于DC2.4细胞后使得其促进淋巴细胞增殖功能增强，上调DC2.4细胞的生物学功能。 4、适宜浓度的甘草甜素作用于 DC2.4细胞，使DC2.4细胞内的酸性磷酸酶活性下降，表明DC吞噬抗原能力下降，提呈能力增加，趋向成熟。 5、适宜浓度的甘草甜素显著增加DC2.4细胞培养上清中IL-12的含量，说明甘草甜素促进DC2.4成熟的同时，上调DC2.4的功能。