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目的以消银解毒颗粒为观察药物,以大鼠为载体制备的药理血清作用于植物血凝素(phytohaemagg lutinin,PHA)和白介素-6(Interleukin-6,IL-6)共同诱导的 Jurkat T 淋巴细胞所建立的银屑病病理细胞模型。并与西药组、通路阻断剂相对比,观察其对Jurkat T淋巴细胞JAK/STAT信号转导通路的影响,从细胞水平探讨消银解毒颗粒治疗银屑病的物质基础,初步阐明凉血解毒法的分子免疫机制及其作用靶点,为银屑病的中医药辨证论治提供理论依据和新方法。方法1.制备动物药理血清,设消银解毒颗粒全方组、拆方组之凉血组、解毒组、阿维A阳性对照组及蒸馏水空白对照组5组。2.体外培养Jurkat T淋巴细胞,加入10 μ g/ml的PHA活化细胞,CCK-8比色法择取重组人IL-6刺激细胞增殖的最佳有效浓度,以及药理血清和阻断剂刺激的由IL-6诱导的Jurkat T淋巴细胞的最佳抑制浓度。3.收集经由药理血清处理过的PHA和IL-6诱导的Jurkat T淋巴细胞,用Western blot、Real-time PCR法检测JAK1、STAT3、GP130的蛋白含量及mRNA的表达量。结果1.加入重组人IL-6刺激后的Jurkat T淋巴细胞都有一定的增殖,10 ng/ml浓度时对细胞增殖作用最明显;2.与空白对照组相比,5%、10%、15%、20%浓度的药理血清均能抑制Jurkat细胞增殖,统计学具有极其显著性差异(P<0.001),20%浓度的药理血清对细胞生长抑制程度最强;3.加入阻断剂都能在一定程度上对Jurkat细胞的存活率造成影响,并具有显著统计学差异(P<0.01),同时结合流式细胞仪检测细胞凋亡,确定浓度为50 μ m/ml时抑制细胞较佳;4.与空白细胞组相比,由PHA+IL-6诱导的细胞中JAK1、STAT3、GP130的蛋白含量及mRNA的表达量均升高,具有极其显著性统计学差异(P<0.001);5.在模型组(PHA+IL-6组)的基础上,加入中药全方、拆方、阿维A、蒸馏水药理血清以及通路阻断剂,观察到各组均能在一定程度上下调JAK1、STAT3、GP130三个指标的蛋白和mRNA的表达量(P<0.05)。结论1.PHA联合IL-6诱导Jurkat T淋巴细胞能够成功建立银屑病病理细胞模型;2.IL-6能够成功开放JAK/STAT信号转导通路;3.中药、西药药理血清和阻断剂均能抑制细胞生长,20%血清的浓度时,全方组抑制作用最强;4.中药、西药药理血清和阻断剂均能抑制JAK/STAT通路的开放;中药组的阻断作用同西药阿维A相当;5.对STAT3的阻断作用强度凉血组与阻断剂组的作用相当,且强于全方组。凉血组中药在整个消银解毒颗粒方中占据重要地位。