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目的:明确盐霉素诱导细胞自噬的发生,并探究细胞自噬在盐霉素抗肿瘤过程中的作用及可能的分子机制。方法:1、用不同浓度盐霉素处理SGC-7901细胞24h后,通过MTT、流式细胞术、荧光斑点实验、免疫荧光和Western Blot,明确盐霉素诱导SGC-7901细胞发生自噬。2、分别建立慢病毒介导的自噬关键基因ATG3过表达及sh RNA干扰的SGC-7901细胞株,通过流式细胞术和Western Blot,探究盐霉素诱导的细胞自噬可能通过ATG3/AKT/m TOR信号途径抵抗盐霉素的抗肿瘤作用。3、分别采用自噬抑制剂3-甲基腺苷(3-methyladenine,3-MA)和ATG5/ATG7 sh RNA干扰的慢病毒处理SGC-7901细胞,通过流式细胞术和Western Blot检测,探讨细胞自噬在盐霉素抗肿瘤过程中的作用。结果:1、盐霉素处理SGC-7901细胞能够抑制细胞增殖,促进细胞凋亡;增加外源性GFP-LC3荧光斑点数以及内源性LC3荧光斑点数;同时下调ATG3蛋白表达,激活AKT/m TOR信号途径;均具有统计学差异。2、成功建立ATG3过表达及sh RNA干扰的SGC-7901稳定细胞株。在ATG3过表达的SGC7901细胞中,ATG3过表达能够激活AKT/m TOR信号途径;盐霉素处理后,ATG3过表达能够减弱盐霉素诱导的LC3-II蛋白水平,同时增强盐霉素诱导的细胞凋亡;均具有统计学差异。在ATG3干扰的SGC7901细胞中,ATG3干扰能够减少盐霉素诱导的细胞凋亡,具有统计学差异。3、在3-MA处理SGC-7901细胞中,自噬抑制能够促进盐霉素诱导的细胞凋亡;同时下调Beclin-1、LC3-II及caspase 3的蛋白水平,上调p62及c-caspase 3的蛋白水平;均具有统计学差异。成功建立ATG5-sh RNA和ATG7-sh RNA干扰的SGC-7901稳定细胞株。在ATG5/ATG7干扰的SGC7901细胞个中,自噬抑制能够减弱盐霉素诱导的LC3-II蛋白表达,同时上调c-Caspase3的蛋白水平,均具有统计学差异。结论:1、盐霉素能诱导胃癌SGC-7901细胞发生自噬。2、细胞自噬可能通过ATG3/AKT/m TOR信号途径抵抗盐霉素的抗肿瘤作用。3、抑制细胞自噬增强盐霉素抗肿瘤作用。