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目的:系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是一种累及多系统多器官的弥漫性结缔组织病,临床表现复杂,发病机制尚不明确,可能涉及遗传、环境、性激素、免疫异常等多种环节。调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)在免疫反应和免疫耐受中起重要作用。许多研究提示,CD4+CD25+调节性T细胞的数量减少或功能异常有可能导致多种自身免疫病的发生。其发挥免疫调节、抑制作用主要是通过:细胞间的直接接触、分泌抑制性细胞因子、表达特异性转录因子FOXP3三种方式。FOXP3是新近发现的一个转录因子,特异表达于机体的CD4+CD25+Tregs,维持CD4+CD25+Treg细胞在胸腺的发育、外周的表达及功能的发挥。研究发现FOXP3基因突变或敲除的小鼠体内CD4+CD25+Treg细胞数量下降,可诱发严重的自身免疫性疾病。FOXP3基因突变可诱发致死性自身免疫病,输注FOXP3+Tregs可使之好转。但是因为FOXP3是新发现的转录因子,目前关于它的研究结果报道不一。 本研究对SLE患者外周血单个核细胞中FOXP3的mRNA水平进行检测,了解其在SLE患者中的表达变化,探索FOXP3在SLE发病中的作用,并探讨其意义,为SLE的免疫学治疗提供新的思路。 方法: 1.共选择实验对象65例,分为三组:SLE初发组:选取初发SLE患者22例;SLE缓解组:选取门诊复查缓解期SLE患者25例;健康对照组:18例选自健康志愿者。 2.应用荧光定量PCR(Real Time PCR)检测各组外周血单个核细胞FOXP3 mRNA的表达变化。 3.同步观察记录治疗前后各临床及实验室指标,并计算各组SLE患者的SLEDAI活动评分。对各组外周血单个核细胞FOXP3 mRNA的表达进行比较,并与各实验室指标进行相关性分析。 4.采用SPSS13.0统计软件处理数据。 结果: 1.三组FOXP3 mRNA在外周血单个核细胞中表达水平的比较:FOXP3mRNA表达水平在SLE初发组0.09(0.08)高于SLE缓解组0.07(0.08),P>0.05,与健康对照组0.07(0.11)比较,P>0.05;SLE缓解组0.07(0.08)与健康对照组0.07(0.11)比较,P>0.05,均无显著性差异。 2.SLE初发组FOXP3 mRNA表达水平与其它各指标相关性分析:FOXP3mRNA表达水平与SLEDAI评分呈负相关,r=0.442,P<0.05;与补体C3、补体C4、24小时尿蛋白定量、ESR均无相关性,P>0.05。 3.按SLEDAI评分将SLE初发组22例分为三组:无活动组5例,轻度活动组6例,中重度活动组11例。三组间FOXP3 mRNA表达水平进行相互比较:中重度活动组FOXP3 mRNA表达水平较无活动组明显下降,P<0.05;而无活动组与轻度活动组、轻度活动组与中重度活动组比较无显著性差异,P>0.05。中重度活动组与SLE缓解组、健康对照组比较,差异均无显著性差异,P>0.05。 4.根据24小时尿蛋白定量是否大于0.5g,将SLE初发组分为:初发狼疮肾炎(LN)组10例,非LN组12例。LN组FOXP3 mRNA表达水平(0.25±0.12)比非LN组(0.16±0.07)高,P>0.05,无显著性差异。 5.SLE缓解期FOXP3 mRNA表达水平与环磷酰胺累积量相关性分析:SLE缓解组FOXP3 mRNA表达水平与环磷酰胺累积量相关系数为r=-0.028,P>0.05,两者无明显相关性。 结论: 1.SLE初发组较缓解组及健康对照组FOXP3 mRNA的表达水平无显著差异性,说明FOXP3 mRNA的表达水平与SLE发病无明显关系。 2.SLE初发组FOXP3 mRNA的表达水平与SLEDAI评分呈明显的负相关,且中重度活动组FOXP3 mRNA表达水平较无活动组明显下降,表明FOXP3 mRNA表达水平与SLE病情活动性有一定关系,有可能成为评价病情活动的指标。 3.初发SLE狼疮肾炎组FOXP3 mRNA的表达水平与非狼疮肾炎组比较,无显著性差异,表明FOXP3 mRNA表达水平与肾脏损害无明显关系。