【摘 要】
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野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris pv.campestris,Xcc)是引起十字花科植物致病的病原菌,是造成经济作物减产的重要因素。Xcc通过水孔或伤口进入植物体内并在维管束中繁殖。植物维管束中的营养物质主要是光合作用的产物-蔗糖,也是Xcc最重要的营养来源之一。病原菌与宿主互作的主要决定因子是Ⅲ型分泌系统(TypeⅢsecretion system,T3SS)。Xcc
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野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris pv.campestris,Xcc)是引起十字花科植物致病的病原菌,是造成经济作物减产的重要因素。Xcc通过水孔或伤口进入植物体内并在维管束中繁殖。植物维管束中的营养物质主要是光合作用的产物-蔗糖,也是Xcc最重要的营养来源之一。病原菌与宿主互作的主要决定因子是Ⅲ型分泌系统(TypeⅢsecretion system,T3SS)。Xcc在侵染宿主后启动T3SS释放毒力因子并快速繁殖,最终造成宿主叶片枯萎坏死。hrp基因编码T3SS组成及调控蛋白,其中T3SS基因表达的主要调控因子是Hrp G和Hrp X。但诱导T3SS表达的信号分子还不清楚。因此,本研究旨在筛选诱导T3SS基因表达的信号分子及其传导的分子机制。本研究利用T3SS基因表达报告菌株hrc U-lac,首先筛选可诱导Xcc T3SS基因表达的信号分子。结果发现二糖分子-蔗糖-是最有效的T3SS诱导分子。然后我们分析了蔗糖跨膜转运和利用相关基因(sux A、sux B、sux C、XC3665、XC3670)在诱导过程中的作用。在hrc U-lac菌株中突变sux A、sux B、sux C、XC3665和XC3670并通过β-半乳糖苷酶活性分析和糖吸收研究了相应突变体的蔗糖利用能力和蔗糖诱导hrc U表达的能力。结果发现sux B参与Xcc的蔗糖利用并严重影响蔗糖诱导hrc U基因表达的能力,但sux A、sux C、XC3665、XC3670没有相似作用。其次,致病力分析发现sux A、sux C、XC3665和XC3670突变对Xcc致病力没有影响,但sux B突变却严重影响Xcc的致病力。为解析sux B通过何种方式调控蔗糖诱导T3SS表达,我们分析了sux B与III型调控因子Hrp G和Hrp X的关系。结果发现sux B并不直接与Hrp G和Hrp X互作,但能调控hrp X基因的表达。该研究结果表明suxB参与Xcc 8004菌株蔗糖的利用,该病原菌的蔗糖利用能力与其致病力成正相关性。蔗糖通过sux B调控T3SS的表达,可能通过影响hrp X的表达来实现调控作用。本文探讨了Xcc蔗糖利用的信号传导机制和其在诱导T3SS表达中的重要作用,为防治黑腐病开辟了新途径。
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