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幼畜体外胚胎培养体系(JIVET)对于充分挖掘优良母畜的生产潜能具有重要意义,不仅有助于加快遗传改良的进程,而且对于商品化胚胎生产也是具有重大的推动作用。犊牛卵母细胞体外发育能力远低于成年牛,卵泡液是卵母细胞生长发育的微环境,卵母细胞体外发育潜能与卵泡液中蛋白成分紧密相关。本研究以超数排卵后犊牛和成年牛卵泡液为研究对象,利用基质辅助激光解离串联时间质谱技术(MALDI-TOFMS)对卵泡液中多肽进行差异分析,并利用双向电泳技术对卵泡液蛋白质组学进行差异蛋白比较。通过这两种技术对卵泡液中蛋白质组学进行全面分析,试图找到与卵母细胞生长发育相关的关键多肽和差异蛋白,为犊牛卵母细胞体外培养体系的完善奠定理论基础。本试验的研究结果总结如下。1.采用基质辅助激光解离串联时间质谱技术(MALDI-TOFMS)对新鲜卵泡液多肽成分进行分析。分别成功构建了两组卵泡液的质谱多肽信号峰模型图谱；在成年牛组中出现30-40个信号峰,犊牛中有60-80个；其中成年牛卵泡液有2个特有信号峰,核质比分别为1218.58(m/z)和1509.77(m/z),犊牛有1个特有信号峰,核质比为953.54(m/z)；利用MASCOT库对获得卵泡液中多肽进行对比,成年牛组发现有18种蛋白,犊牛组有11种蛋白,其中仅有1种共有蛋白是牛晶体结构修饰纤维蛋白A链。2.采用双向电泳技术对犊牛和成年牛卵泡液中蛋白质组学分析。采用24cm胶条,上样量350微克,在pH4-7范围内成功构建出犊牛和成年牛卵泡液蛋白质组学图谱,犊牛卵泡液图谱中存在319个蛋白点,成年牛338个蛋白点。对差异蛋白点进行质谱技术鉴定,结果表明：成年牛卵泡液中存在1个表达量低于犊牛的蛋白点为肿瘤坏死因子α,犊牛中存在3个表达量低于成年牛蛋白点,分别为转铁蛋白、卵母细胞成熟因子mos、BCL2L12。本文总结：(1)对犊牛与成年牛卵泡液中多肽信息差异进行分析,仅发现一个共有蛋白,即牛晶体结构修饰纤维蛋白A链；(2)在对卵泡液差异蛋白分析中,成功鉴定出了4种蛋白,分别为转铁蛋白、卵母细胞成熟因子mos、BCL2L12和肿瘤坏死因子α。