饲粮蛋白水平对雌性大鼠初情启动和卵泡发育的影响

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Kisspeptin/GPR54信号系统是参与调控动物情期启动和卵泡发育的关键组成部分,目前关于蛋白质营养对Kisspeptin/GPR54信号系统的影响及其与情期启动关系研究非常少。因此本研究旨在考察不同蛋白水平对SD雌性大鼠初情启动和卵泡发育的影响,并探讨Kisspeptin/GPR54信号系统在其中的作用。研究选取80只21日龄断奶SD雌性大鼠,通过增加或者降低日粮酪蛋白与淀粉比例,饲喂4种总能一致但蛋白水平不同饲粮,分别为8%(CP8,n=20),13%(CP13,n=20),18%(CP18, n=20),23% (CP23, n=20)。从26日龄开始检测大鼠阴道开口状况,进行阴道涂片制作,记录阴道开口和第一次发情间期时间和体重,直至第2次发情前期出现,禁食8小时屠宰取血样、下丘脑、垂体、卵巢、子宫、腹部脂肪、肝脏。测定指标主要包括:卵巢切片形态,血清氨基酸、IGF-I、Leptin以及与初情启动相关的性激素浓度,下丘脑和卵巢中与初期启动相关基因mRNA的表达量。结果如下:1、蛋白水平显著影响大鼠初情期日龄(P<0.05),CP8、CP13、CP18、CP23组大鼠阴道开口日龄分别为42.25天、36.93天、36.13天、33.86天,随着饲粮蛋白质水平的升高,大鼠的初情日龄呈线性缩短(y=-0.3328x+127.5,R2=0.949、P=0.025)。2、CP8组大鼠阴道开口体重显著低于CP18组(P<0.05),但与CP23组差异不显著(P’>0.05)。对各组大鼠进行剖检,发现随着蛋白水平升高,大鼠腹部脂肪含量与指数逐渐降低。3、蛋白质水平显著影响了初情期大鼠繁殖组织和卵泡发育。CP8和CP13组大鼠卵巢和子宫的绝对重量和相对重量显著低于CP18和CP23组(P<0.05)。CP8和CP13组大鼠有腔卵泡和黄体的数目显著低于CP23和CP18组(P<0.05),但是无腔卵泡的数目显著高于CP23和CP18组(P<0.05),各处理组之间闭锁卵泡的数目差异不显著。4、大鼠血清IGF-I、Leptin和LH浓度各处理组之间差异不显著。但是E2. GnRH和FSH的浓度随着蛋白水平的增加显著提高(P<0.05)。各处理组血清氨基酸的变化显示,随着蛋白水平的提高必需氨基酸的浓度逐渐升高,但是非必需氨基酸的浓度逐渐下降(P<0.05)。5、通过检测大鼠初情启动相关基因表达,发现CP8和CP13组大鼠下丘脑KiSS-1和ERa的mRNA表达量显著低于CP18组和CP23组大鼠(P<0.05),并且CP8组大鼠KiSS-1基因表达量最低,显著低于CP13组大鼠(P<0.05)。CP8和CP13组大鼠卵巢组织中FSHR和LHR表达量显著低于CP18和CP23组(P<0.05)。根据以上结果可知,饲粮蛋白质限制损害大鼠繁殖组织和卵泡发育,并推迟初情日龄。蛋白质限制降低下丘脑KiSS-1基因的表达量,可能是导致大鼠卵泡发育受阻、初情日龄延后,初情启动推迟的主要原因。
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