重组疫苗E.coli LLO/WT1诱导人树突状细胞成熟及T细胞溶瘤作用研究

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目的:观察重组疫苗E.coli LLO/WT1体外诱导健康人外周血树突状细胞成熟并刺激T细胞增殖的效果,并检测致敏T细胞对WT1阳性肿瘤细胞(人胃癌细胞株SGC-7901)的杀伤作用。方法:以E.coli为对照,用E.coli LLO/WT1刺激健康人外周血树突状细胞(dendritic cell, DC)后,流式细胞术分析DC的CD83、CD86和HLA-DR的表达;MTT法观察活化DC刺激T细胞增殖的效果; ELISA检测DC、DC和T细胞混合培养上清液内IL-12和IFN-γ的含量;并观察致敏T细胞对表达WT1肿瘤细胞(人胃癌细胞株SGC-7901)的杀伤作用。结果:经E.coli LLO/WT1和E.coli刺激24小时后的树突状细胞CD83、CD86和HLA-DR阳性率分别为78.1%,83.4%,93.2%和65.8%,61.2%,75.8%;DC培养上清液IL-12的含量分别为204.17±4.2(3pg/mL)和270.42±3.85(pg/mL)(p<0.05);E.coli LLO/WT1较E.coli活化的DC诱导了更明显的T细胞增殖; DC和T细胞混合培养上清内的IFN-γ含量分别为86.32±2.00(pg/mL)和44.71±1.45(pg/mL) (p<0.05);E.coli LLO/WT1和E.coli活化DC诱导的T细胞对WT1阳性SGC-7901胃癌细胞的杀伤率分别为(68.44±3.78)%和(36.76±2.63 )%(p<0.05)。结论:重组疫苗E.coli LLO/WT1能高效活化人外周血树突状细胞,促进T细胞增殖并发挥较强的WT1特异性溶瘤作用。
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