多型炭角菌Xylaria polymorpha和松木针层孔菌Phellinus pini的深层培养及多糖提取的研究

来源 :中国科学院微生物研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qiangchengshimeng
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对多形炭角菌Xylaria polymorpha和松木针层孔菌Phellinus pini的生长条件进行研究.多形炭角菌在4﹪葡萄糖,1﹪蛋白胨,pH6.5,25℃,250ml三角瓶装80ml培养液的条件下生长的最好,发酵终点为168小时.正交试验得到对K<+>,Mg<2+>,Ca<2+>,Fe<2+>,Mn<2+>,Cu<2+>等金属离子的需求的最适浓度分别为0.15﹪,0.03﹪,0.05﹪,0.0015﹪,0.001﹪,0.00005﹪,0.0002﹪.松木针层孔菌在3﹪葡萄糖,3﹪麦芽糖,1.5﹪蛋白胨,1.5﹪黄豆粉,pH6,25℃,150ml三角瓶装80ml培养液的条件下生长的最好,发酵终点为264小时.但不能在该论文所设计的合成培养基(主要由金属化合物组成)中生长.在250L发酵罐的条件下,定时测定多型炭角菌发酵液中的pH、还原糖,并保持溶氧量≥40﹪,发酵终点为75小时.培养得到的多形炭角菌和松木针层孔菌菌丝体经过水提、除蛋白和干燥等过程得到两种水溶性粗多糖X-1,X-2.离心除去菌丝体的炭角发酵液经浓缩、除蛋白和干燥等过程得到发酵液粗多糖X-3.在分别经SephadexG-100,SephadexG-150凝胶柱层析得到精制多糖.三种精制多糖的纸层析,琼脂糖电泳,聚丙烯酰胺凝胶电泳和醋酸纤维膜电泳均为单一斑点,证明其为纯品,蛋白质含量分别为15.93﹪,23.34﹪和41.06﹪,且均由16种氨基酸组成(除色氨酸和胱氨酸测定不出).红外光谱和质谱分析其结构.将水提的炭角菌菌丝体粗多糖进行毒性动物试验.在急性毒性动物试验中,最大浓度组及其它各组小鼠均无死亡,证明炭角菌菌丝体水提粗多糖无毒性,并确定了小鼠对炭角菌菌丝体粗多糖的最大耐受量为50﹪.
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