温湿环境因子对肉羊生理指标及热休克蛋白表达的影响研究

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高温高湿环境影响动物的生产、生活,威胁动物健康,使经济效益降低。目前有关于羊的环境研究多集中于温度对其影响,关于双因素(温度和湿度)共同作用对羊的影响报道较少。本试验使用数字化智能环控代谢实验舱,精准控制温热环境因子(温度和相对湿度),研究不同温度和湿度条件对肉羊生理参数、免疫、内分泌指标及相关热休克蛋白表达量的影响,为进一步了解温湿度对肉羊生产性能和机体健康的影响机制和肉羊适宜环境温湿度条件提供理论依据。试验一温度和相对湿度对肉羊生理参数、内分泌和免疫指标的影响本试验选取18月龄左右体况良好,体重相近(36.3±3.2 kg)的肉羊(波尔山羊与关中奶山羊杂交一代)8只,随机分为2组,分别饲养在环控代谢实验舱内。采用4×4双因素完全随机设计,其中温度设4个水平(26℃,30℃,34℃,38℃),相对湿度(RH)4个水平(35%,50%,65%,80%),试验期5天,适应期30天。结果表明:(1)呼吸频率和5个部位(头部、背部、腹部、胸廓左侧、胸廓右侧)皮肤温度为38℃>34℃>30℃>26℃(P<0.05)。34℃组心率显著低于30℃组(P<0.05),38℃组心率显著低于其他温度处理组(P<0.05),26℃和30℃组心率和直肠温度均显著低于34℃和38℃组(P<0.05)。80%RH组直肠温度显著高于30%RH组(P<0.05)。(2)48 h时,30℃组血清T3水平显著高于38℃组(P<0.05),38℃组T4水平显著高于30℃和34℃处理组(P<0.05),30℃组血清COR水平显著高于26℃和38℃组(P<0.05)。在96 h,26℃和30℃组血清T4水平均显著高于34℃和38℃组(P<0.05),不同温度处理下血清COR水平变化不明显(P>0.05)。80%RH组COR水平显著高于30%RH和50%RH组(P<0.05)。96 h时30℃和34℃的T3和COR水平,38℃的T4水平,均显著低于48 h(P<0.05)。(3)48 h时,26℃组血清中IL-4水平显著高于34℃组(P<0.05),34℃的IL-6水平显著高于30℃组(P<0.05)。48 h时,65%RH组血清IgA含量显著高于35%RH组(P<0.05),65%RH组血清IgM、IgG含量显著高于50%RH和35%RH组(P<0.05),35%RH的IL-2含量显著高于其他湿度组且80%RH组最低(P<0.05),65%RH和80%RH的IL-4显著高于35%RH组(P<0.05),35%RH的IL-6显著高于65%RH和80%RH组(P<0.05)。在96 h时,35%RH的IL-4显著高于80%RH组(P<0.05)。96 h时,30℃和38℃组IgA和IgM、30℃组IgG和34℃组IL-6,均显著低于48 h。而96 h时,34℃和38℃组IL-4显著高于48 h。温度和相对湿度对IgA、IgM、IgG的影响48 h的含量都高于96 h。96 h时,30℃组血清C3含量显著高于38℃组,26℃和30℃组血清C4含量均显著高于34℃和38℃组(P<0.05)。48 h时,80%RH组血清LZM含量显著高于50%RH组(P<0.05),80%RH的C4显著高于35%RH组(P<0.05)。96 h时,26℃、30℃、38℃和50%RH组的LZM,38℃和80%RH组的C4,均显著低于48h。而96 h时26℃组的C4显著高于48 h。试验二温度和相对湿度对肉羊热休克蛋白表达量的影响试验设计同试验一,分别于48 h和96 h静脉采血,测定血液中热休克蛋白(HSP)的表达量。结果表明:(1)48 h和96 h两个时间点相比,最低HSP60 mRNA表达量分别为26℃和34℃组,最高均在30℃组。48 h和96 h表达量最高湿度组分别为35%RH和65%RH组,最低都在50%RH和80%RH组。HSP70 mRNA的表达量,48 h和96 h最低表达量温度都在26℃组,最高分别在38℃和34℃组。湿度48 h和96 h最高都在80%RH,最低都在65%RH组。HSP90 mRNA表达量,48 h和96 h最低表达量温度分别在34℃和30℃组,最高都在38℃组。湿度48 h和96 h最高都在80%RH组,最低分别在50%RH和65%RH组。HSP110 mRNA表达量,48 h和96 h最低表达量温度都在26℃组,最高都在30℃组。湿度48 h和96 h最高分别在35%RH和80%RH组,最低都在65%RH组。(2)热休克蛋白的蛋白相对表达量:48 h和96 h的HSP60的蛋白最低表达量温度都在26℃组,最高在38℃组。湿度条件下48 h和96 h最高分别在35%RH和80%RH组,最低都在50%RH和65%RH组。HSP70蛋白表达量,48 h和96 h最低表达量都在26℃组,最高分别在30℃和34℃组。湿度条件下48 h和96 h最高分别在35%RH和50%RH组,最低分别在80%RH和35%RH组。HSP90蛋白表达量,48 h和96 h最低表达量温度都在26℃组,最高分别在38℃和30℃组。湿度条件下48 h和96 h最高分别在35%RH和50%RH组,最低都在65%RH组。HSP110蛋白表达量,48 h和96 h最低表达量温度都在26℃组,最高分别在34℃和38℃组。湿度条件下48 h和96 h最高分别在50%RH和80%RH组,最低都在65%RH组。试验结论:(1)随着温度(26-38℃)和湿度(35-80%RH)的升高,肉羊生理参数指标发生明显变化、内分泌激素水平改变、免疫功能下降,严重影响动物的健康。(2)不同热休克蛋白表达水平的变化趋势不同,对维护细胞内环境稳定具有重要作用。根据热休克蛋白的表达变化规律,优先考虑HSP70 mRNA的表达水平作为评估热应激的客观指标。以热休克蛋白的表达情况为依据,评估肉羊在本研究中温度在26℃、相对湿度在65%RH较适宜。
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