家蝇幼虫血淋巴组分MAF-1对人胃癌SGC-7901细胞作用机制的初步研究

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目的:探讨家蝇幼虫血淋巴组分MAF-1对人胃癌SGC-7901细胞G2/M期的阻滞作用及分子机制。  方法:  1、家蝇幼虫血淋巴组分MAF-1的制备:用固相萃取、RP-HPLC从热诱导3日龄家蝇幼虫血淋巴分离纯化得到MAF-1。  2、抗肿瘤作用机制的分析:采用MTT比色实验、流式细胞术和Western blot等方法、体外分析MAF-1对肿瘤细胞增殖的抑制作用,以及SGC-7901细胞周期分布及细胞周期相关蛋白的表达变化,实验设正常细胞对照。  结果:  1、MTT法显示,MAF-1可以显著抑制SGC-7901细胞的体外生长,50μg/mL MAF-1作用SGC-7901细胞48h,与阴性对照组相比,可使细胞增殖抑制率达到37.2%;  2、流式细胞仪分析结果显示MAF-1将SGC-7901细胞阻滞在G2/M期,50μg/mL MAF-1作用SGC-7901细胞48h,与阴性对照组相比,可使G2/M期细胞显著增加近3倍;  3、Western blot分析表明MAF-1作用SGC-7901细胞48h,与阴性对照组相比,细胞周期蛋白B1(CyclinB1)和细胞周期蛋白依赖性激酶-1(CDK1)与表达均明显下降,其中CDK1的表达下降更为明显。  结论:  1、MAF-1可以显著抑制SGC-7901细胞的体外生长;  2、MAF-1对SGC-7901细胞的抑制增殖作用与G2/M期阻滞有关,MAF-1对SGC-7901细胞G2/M期阻滞的分子机制可能与降低CyclinB1和CDK1蛋白表达水平有关。
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