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目的:肿瘤细胞代谢的主要代谢方式为无氧呼吸的第一阶段有氧糖酵解。它可以活化被称为山梨醇途径的多元醇途径。该途径是导致糖尿病患者中各种糖尿病并发症的重要因素。但是通过糖酵解途径进行能量代谢的肿瘤细胞却不受多元醇途经的影响。我们认为乳酸脱氢酶(LDHA)在肿瘤细胞代谢中起着至关重要的作用。 方法:本研究通过亲和层析法从大肠杆菌纯化出乳酸脱氢酶(LDHA)和山梨醇脱氢酶(SDH)。总体纯化得到浓度为0.37mg/ml蛋白质的LDHA，得到浓度为0.58mg/ml蛋白质的SDH。利用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术计算出纯化后的目的蛋白质纯度和确定酶的亚单位分子量。LDHA和SDH的亚基分子量分别为39kDa和37kDa。 结果:在山梨醇与NAD+反应的方向上，LDHA以山梨醇为反应底物在25℃和37℃的条件下kcat值分别为0.026和0.0264，以NAD+为反应底物在25℃和37℃的条件下kcat值分别为0.118和0.13。在山梨醇与NAD+反应的方向上，SDH以山梨醇为反应底物在25℃和37℃的条件下kcat值分别为0.0118和0.101。以NAD+为反应底物在25℃和37℃的条件下kcat值分别为0.136和0.1。 结论:通过比较酶动力学参数，我们认为LDHA替代了这些癌症中的SDH行使了代谢山梨醇的作用。