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哌嗪作为一种有效的驱虫药,在兽医临床上应用广泛。然而,不规范的使用造成动物源性食品中哌嗪残留严重,长期食用含有哌嗪的动物食品及其制品,会对人类健康造成威胁。目前,国内外动物组织中哌嗪残留检测相关研究较少。本研究以京海黄鸡、樱桃谷鸭、扬州鹅以及杜×长×大三元杂交猪为实验素材,综合利用柱前衍生、加速溶剂萃取和固相萃取等技术,建立禽和猪肌肉、肝脏、肾脏以及(皮肤+脂肪)组织中哌嗪残留气相色谱-串联质谱检测方法(GC-MS/MS),为动物源性食品中哌嗪残留检测标准的制定提供科学依据,为残留监控提供技术手段。本实验主要研究结果如下：1.建立和优化了乙酸酐法衍生哌嗪的实验条件,即20μg哌嗪标准品(完全溶于二氯甲烷溶剂)添加50μL乙酸酐和100μL三乙胺(添加量均过饱和),50℃密闭容器中反应30 min,衍生产物为哌嗪N,N-双取代产物1,4-二乙酰基哌嗪,并成功应用于气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)分析,改善了哌嗪的色谱特征,峰形尖锐,定量准确。2.建立和优化了采用加速溶剂萃取仪(ASE350)提取禽和猪组织中哌嗪残留的方法。乙腈作为提取溶剂,样品依次与无水硫酸钠、硅藻土研磨混匀装填入萃取池,80℃、1500psi条件下,在线去脂(正己烷做脱脂剂)与哌嗪萃取(乙腈作为萃取剂)连续进行。哌嗪在禽和猪组织中的添加水平分别为定量限(LOQ)水平、50.0、100.0、500.0、1000.0和2000.0 μg/kg浓度时,各组织样品平均回收率均在80.98%-96.26%之间,相对标准偏差均在1.58%-4.53%之间。该提取方法溶剂用量少,样品基质影响小,萃取效率高,回收率高,且安全、快速、全自动。3.首次建立和优化了禽和猪肌肉、肝脏、肾脏以及(皮肤+脂肪)组织中哌嗪残留的气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)确证检测方法。采用EI模式,SCAN和SIM扫描定性,Auto SRM结合外标法定量；在各组织中添加哌嗪4.5～2500.0μg/kg浓度范围内,定量离子对m/z170.1>68.1的色谱峰面积与其浓度线性关系良好,决定系数R2=0.9995；各组织精密度测定结果：日内相对标准偏差均在1.15%-5.92%之间,日间相对标准偏差均在2.03%-8.10%之间。在优化的实验条件下,哌嗪在禽和猪组织中的检测限(LOD)在1.4～1.6Hg/kg (S/N≥3),定量限(LOQ)在4.8～5.2μg/kg (S/N≥10)。方法验证参数均满足中国农业部、欧盟和美国FDA兽药残留检测的要求,定量准确、快速、灵敏度高。