非清髓自体造血干细胞移植治疗1型糖尿病的临床疗效和机制研究

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1型糖尿病(T1D)是胰岛β细胞特异性的自身免疫性疾病。胰岛素治疗是目前临床唯一的治疗手段,但低血糖及其他并发症发生率高。近年来采用免疫抑制方法如anti-CD3单克隆抗体等使治疗方法上有所突破,但无法恢复β细胞功能从而解决患者耐受和胰岛细胞再次破坏的问题。2007年首次报道非清髓自体造血干细胞移植(HSCT)可以恢复β细胞功能,从而使T1D病人达到长期缓解。但由于HSCT潜在的并发症,非常有必要在其他独立人群中进一步验证其疗效,同时探讨治疗机制。  目的:确认HSCT对T1D的治疗疗效并进行机制研究。  方法:我们对9例初发T1D患者进行了非清髓自体HSCT,随访12个月观察其临床疗效。同时分析治疗前后淋巴细胞亚群和细胞因子改变,并分析病人治疗前后外周血单个核细胞(PBMC)基因表达谱的改变。  结果:6例病人在移植后12个月脱离胰岛素治疗达到正常血糖水平,而3例病人仍需要胰岛素治疗维持正常血糖水平。我们根据胰岛素使用情况将病人分为两组,IF(insulin free)组和ID(insulin dependent)组。IF组C肽在治疗后6个月和12个月明显大于治疗之前水平,而ID组病人C肽在各随访点和治疗前无明显变化。治疗后12个月IF组C肽明显高于ID组。无严重的并发症和死亡病例出现。淋巴细胞各亚群包括CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞和B细胞在移植后3个月都明显低于治疗前的水平,而NK细胞在移植后3个月己恢复到治疗前水平,B细胞在移植后6个月恢复到治疗前水平,其他各组分在治疗后12个月恢复到治疗前水平。两组淋巴细胞亚型免疫重组过程无明显差异。在治疗后的各个随访时间点,IFN-γ、IL-4、IL-6、MCP-1、MIP-1β、TNF-α、IL-8和IL-7都没有明显变化。9例病人治疗后6个月较治疗前共有343个基因表达上调,673基因表达下调,其中上调最为明显的是NK细胞介导的信号通路。IF组治疗前后差异基因数目明显多于ID组,两组在治疗之后既有相同的也有特异的信号通路发生变化,其中在ID组变化最明显的是IFN-gamma signalingpathway。共表达网络分析表明两组在治疗前后基因的连通性(genecomlectivity)和关键基因也存在显著差异。  结论:非清髓自体HSCT可以恢复初发T1D病人胰岛β细胞功能,达到长期脱离胰岛素治疗并维持正常血糖的疗效。其机制可能与自身免疫性T细胞的清除和相关基因及通路的调控相关。
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