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目的:通过检测多囊卵巢综合征(Polycystic ovary syndrome,PCOS)患者的血清及卵泡液与正常对照组间micro RNA-483-5p(miR-483-5p)的表达差异,以及不同表型PCOS患者的血清及卵泡液中miR-483-5p的表达差异,探讨其与肥胖的相关性,旨在研究miR-483-5p是否可作为PCOS的生物标志物,为PCOS的发病机制及临床分型提供表观遗传学依据,从而为阐明PCOS的发生发展机制及探求诊断和治疗的新靶点提供新思路。方法:PCOS的诊断依据鹿特丹会议的标准。收集2015年1月至2015年12月于我中心就诊的进行IVF/ICSI-ET助孕的PCOS患者的血清与卵泡液(n=30),同时收集同期卵巢功能正常的患者的血清和卵泡液作为对照(n=15)。以上患者年龄<35岁,均无卵巢囊肿、卵巢肿瘤、卵巢手术史、放化疗史,无子宫内膜异位症、甲状腺功能亢进/减退症及高泌乳素血症等其他内分泌疾病。分组情况如下,A组:根据体重指数(BMI)将30例PCOS患者分为:A1组(肥胖组)BMI≥25㎏/㎡,A2组(非肥胖组)BMI<25㎏/㎡;B组:正常对照组。肥胖的诊断标准:按照亚洲人的BMI标准。抽取患者肘静脉血4 ml,以2000 r/min离心5min后取血清,置于-80℃冰箱中保存。所有患者均进行控制性超促排卵治疗,当至少有一个卵泡直径生长到≥17mm时,给予皮下注射艾泽250μg,36-38小时后穿刺取卵。选取的实验卵泡直径≥17mm,在阴道B超的引导下穿刺卵泡取卵时获得卵泡液,留取大约4 ml的无血污染且清亮的卵泡液,离心后留取上清。利用Trizol法提取血清及卵泡液总RNA,使用超微量紫外分光光度仪检测RNA的浓度、纯度和完整性;逆转录后进行Real Time PCR,反应按SYBR?Premix Ex TaqTMⅡ试剂盒说明书操作,反应条件为95℃预变性3min,95℃变性12s,62℃退火延伸40s,循环40次。每个样品的PCR反应平行重复三个孔,所有RT-PCR实验独立重复三次。miR-483-5p相对表达水平以cel-mir-39-3p为外参,根据待测基因和内参的循环数CT值,按照公式:相对值=2-??CT计算出样本待测基因相对于外参基因的相对表达量。统计方法:应用SPSS 22.0软件包进行统计学分析,计量资料均以均数±标准差(mean±SD)表示。如果统计资料符合独立、正态、方差齐的条件,则多组均数之间的比较采用单因素方差分析(One Way ANOVA)。如果统计资料不符合独立、正态、方差齐的条件,则用秩和检验。计数资料的比较采用卡方检验或者Fisher确切概率法。P<0.05为差异有统计学意义。结果:基本资料统计分析,PCOS组与正常对照组相比较,年龄、不孕年限、基础血清E2值、基础血清FSH值之间无统计学差异(P>0.05)。基础血清LH值、基础血清T值、血清Glu值、血清INS值之间差异有统计学意义(P<0.05)。实验资料统计分析,PCOS组与正常对照组相比较,血清中miR-483-5p的相对表达量无统计学差异(P>0.05),卵泡液中miR-483-5p的相对表达量有统计学差异(P<0.01)。PCOS肥胖组与PCOS非肥胖组比较,血清及卵泡液中miR-483-5p的相对表达量均无统计学差异(P>0.05)。结论:PCOS可导致内分泌异常、胰岛素抵抗、并增加患2型糖尿病的风险。卵泡液中miR-483-5p的表达与血清中miR-483-5p的表达趋势相同,均表现为PCOS组比正常对照组升高,但是仅卵泡液中miR-483-5p的表达有统计学差异,血清中miRNA结构并非是反映卵巢最基础变化所必需,PCOS患者血液中的miRNA的作用和重要性仍需要进一步研究。不管是血清还是卵泡液中,PCOS肥胖组和PCOS非肥胖组的miR-483-5p的表达并无统计学差异。这或许可由PCOS的异型性、研究对象、所使用的对照组的差异性来解释。因此,需要更多的研究去解决这些有分歧的发现。