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目的：探讨乌司他丁对氧化损伤海马神经元线粒体能量代谢、膜电位变化，以及凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白（BCL-2）、线粒体钙单向转运蛋白（MCU）的影响和可能的机制。 方法：分离SD胎鼠海马，采用无血清培养原代海马神经元，取培养至第9天的神经元，采用H2O2建立氧化应激损伤模型，分为空白对照组（N），H2O2组（H），乌司他丁预处理1000u/ml+H2O2组(UTI1+H），乌司他丁预处理2000u/ml+H2O2组（UTI2+H），倒置相差显微镜观察神经元形态的改变，酶标仪检测神经元的Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活性；荧光显微镜观察JC-1法检测线粒体膜电位变化；Annexin-V-Fluorescein/PI双染法和Hoechst33342/PI双染法测神经元凋亡率；采用RT-PCR及Western-blot检测BCL-2、MCU蛋白的表达。 结果：1、采用无血清培养原代海马神经元生长良好，培养8-14天的神经元长势最好，细胞核立体感强，轴突联接成网络，神经元纯度为92.05％，满足实验要求。2、各组形态改变，H组可见神经元胞浆浓缩，细胞核边集，胞间隙增大，轴突断裂，少部分细胞悬浮。UTI1+H和UTI2+H组可见细胞保持完整形态，部份细胞皱缩，胞体有光晕。3、ATP酶的测定：与N组比较，H组Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性降低（P<0.05），与H组比较，UTI1+H和UTI2+H组Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性升高（P<0.05），UTI1+H和UTI2+H组间差异具有统计学意义（P?0.05）。4、对细胞凋亡相关指标的影响：与N组比较，H组线粒体膜电位降低、凋亡率升高（P<0.05），与H组比较，UTI1+H和UTI2+H组线粒体膜电位升高、凋亡率降低（P<0.05），UTI1+H和 UTI2+H组间差异具有统计学意义（P<0.05）。5、BCL-2、MCU的表达：与N组比较，H组BCL-2蛋白表达降低，MCU蛋白表达增加（P<0.05），与H组比较，UTI1+H和UTI2+H组BCL-2蛋白表达增加，MCU表达降低（P<0.05），UTI1+H和UTI2+H组间BCL-2表达差异具有统计学意义（P<0.05），MCU表达差异无统计学意义(P>0.05)。 结论：1、氧化应激损伤的神经元可导致能量代谢障碍、线粒体膜电势能降低、细胞凋亡等病理改变。2、经过浓度为1000U/ml、2000U/ml乌司他丁预处理可以抑制 H2O2诱导的海马神经元细胞氧化应激损伤，这可能与其维持细胞能量代谢、稳定线粒体膜电位，升高BCL-2表达，降低MCU表达，从而降低细胞凋亡率有关。