基于酶活性的自锚定荧光探针合成与性能初步研究

来源 :华东理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jenny18
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
酶作为一类重要的生物催化剂,广泛存在于各种有机生物体内,对生物体的各项生命活动具有至关重要的作用。荧光探针在酶的检测方面具有简便、快速、直观等优点,并得到快速的发展和广泛的运用。本论文运用自锚定策略分别设计了以β-内酰胺酶、β-半乳糖苷酶为靶标的荧光探针,以形成共价键的形式完成了对靶标酶的荧光标记和检测。  论文共分为四章:  第一章简述了荧光探针的发展现状和作用原理,并详细介绍了自锚定策略在荧光探针领域的发展与应用。  第二章中,基于β-内酰胺酶活性,设计发展了能够荧光标记表达β-内酰胺酶的大肠杆菌的自锚定探针CFC-4和CFC-3,通过对蛋白标记实验、细菌实验的验证,证明CFC-4被酶水解后生成QMs并与周围蛋白共价键结合,实现了对靶标酶荧光标记的目的。这一探针与之前报道的标记CFC-2相比,具有更高的荧光响应。  第三章里,设计发展了一种基于荧光素的自锚定荧光探针12。通过SDS-PAGE分析、荧光成像等实验验证了该荧光探针能够特异性共价键标记β-内酰胺酶TEM-1bla和NDM-1bla,为后期的进一步应用奠定了基础。  第四章中,设计并合成了一系列具有不同锚定基团的β-半乳糖苷酶自锚定荧光探针Ⅰ-Ⅵ,并对它们对β-半乳糖苷酶标记效能以及其标记特异性的探究。实验结果显不,QMs前体上N原子取代的探针Ⅴ在被β-半乳糖苷酶激活前呈现出较低的非特异性标记,而被激活后却表现出了很高的标记效能。
其他文献
血吸虫病严重危害人类身体健康,导致大量患者劳动力丧失;严重影响了经济发展,带来的不安定因素阻碍了社会的和谐与稳定。因此,血吸虫病的防治具有重大意义。血吸虫病最基本的病变
课堂提问的天时指的是提问的时机,妙用课堂提问的天时激发学生思维;提问的地利是指课本内容的选择利用,妙用课堂提问的地利切中教学命脉;提问的人和指的是调动学生的兴趣,它
本文研究了炔酸酯、烯酰胺及其衍生物在连二亚硫酸钠各和多种金属引发剂下引发的氟烷基化反应,并对反应的立体选择性进行了研究。 炔丙基丙二酸二乙酯或炔丙基乙酰乙酸乙酯
语文是一门实用性很强的学科,与学生的学习生活密切联系.听说读写的过程,不仅是学习的过程,也是运用语文知识进行语文实践的过程.在这个实践过程中,使学生认识、体会到语文知
目的:研究多形拟杆菌干预糖尿病模型小鼠后肠道定植情况,以及与胰高血糖素样肽1(GLP–1)相关性,探索多形拟杆菌定植后对糖尿病影响的可能机制。方法:用BHI血琼脂培养基培养ATCC2914
本研究以中药白术为研究对象,开展饮片的炮制工艺研究以及质量标准的制定和高速逆流色谱技术在中药饮片白术质量控制中的应用研究。 中药白术主产浙江,安徽,为栽培品,少有野生
2017年7月7日,应中国科学院水下航行器信息技术重点实验室副主任郝程鹏研究员的邀请,意大利尼古拉·库萨诺大学Danilo Orlando副教授一行来到中国科学院声学研究所进行交流访
随着新课程改革的深入推进,中学语文教学在教学理念、教学模式、教学方法等方面都有了较大的改进.但某些语文教师在走出旧误区的同时又陷入了新的误区,笔者归纳的新误区主要
中职语文教学成效低下制约着中职人文素质教育的推进,因此中职语文教学要与时俱进,实事求是,更新思维,重起炉灶.本文以新课改下语文课程改革实践为例,从教学目标定位、教学内
教师要努力激发学生课外阅读的兴趣,让他们愉悦地进行课外阅读,快乐地接受自己想要学习的语文知识.我们要进一步引导他们不仅爱读,而且会读,要读得更好更有收效.鼓励学生课外