同化激素(Anabolic Hormones)是由天然性激素经过结构改造而得到的半合成类固醇激素,以降低性激素活性、提高蛋白同化活性。由于同化激素能减少脂肪沉积、提高瘦肉比率、改善饲料转化效率,自上世纪50年代开始曾被大量使用在食品动物。长期食用含有此类同化激素的动物可食性组织可给人类带来健康风险。因此,自1988年便已被欧盟禁止作为促生长剂用于畜禽养殖,我国农业部235公告也明确禁止17α-甲基睾酮和群勃龙使用于所有动物,并不得在所有可食性组织中检出。本研究建立了猪毛发中8种同化激素(睾酮、17α-甲基睾酮、群勃龙、群勃龙醋酸酯、勃地龙、苯丙酸诺龙、诺龙、炔诺酮)的液相色谱-串联质谱多残留检测方法;并研究了多剂量内服、单剂量肌注两种不同给药方式下,17α-甲基睾酮在猪毛发中的蓄积规律。毛发样品经三(2-羧乙基)膦盐酸盐水解、叔丁基甲醚提取、C18固相萃取柱净化,最后经流动相复溶。以0.1%甲酸水溶液(A)和乙腈(B)为流动相,采用Agilent Zorbax SB-Aq色谱柱对8种同化激素进行分离;在电喷雾离子源、正离子扫描、多反应监测模式下对目标化合物进行定量分析。梯度洗脱程序为:0.0~1min,30%B;1.0~3.0 min,55%B;6~12 min,98%B;12.5~18 min,30%B。进样量5μL。8种同化激素在猪毛发中的检测限为0.3~3 ng/g,定量限为0.75~6 ng/g;在10~1000 ng/g的浓度范围内线性关系良好(r2>0.99);低、中、高三个添加水平的平均回收率为75.2~112.7%;批内变异系数为1.4~8.2%,批间变异系数为2.5~8.6%。方法稳定性好、灵敏度高,满足多残留检测的要求。选用体重为(20.0±3.5)kg的杜长大三元杂交猪6头,随机分两组。一组按4 mg/kg体重内服17α-甲基睾酮、连续给药30天,另一组按4 mg/kg体重单剂量肌肉注射17α-甲基睾酮,毛发样品均采集到首次给药后第61天。以时间为横坐标、浓度为纵坐标,分析17α-甲基睾酮在猪毛发中的残留规律。结果表明,多剂量内服给药组,第一次给药后第10天,毛发中药物浓度达到峰值,而后出现下降,到约16天后趋于稳定,停药后逐渐下降;单剂量肌注给药组,在给药后第10天达到药物浓度峰值,而后迅速下降;两种给药途径,在给药后第61天均仍能检测到17α-甲基睾酮。相对于血浆、尿液、组织这些常规检测基质的短期检测,使用毛发作为检材满足了长期检测的需求,大大延长了违禁药的检测时间窗口。根据其蓄积规律还可以大致推断出动物违规使用17α-甲基睾酮时间点。本研究为监控同化激素在猪的违规使用提供了毛发中高灵敏的多残留检测方法,并以17α-甲基睾酮为代表药物,通过对不同时间点的药物浓度进行分析,推断药物违禁使用时间窗,为违禁药使用后的监控提供了科学评价依据。