东方粘虫Mythimna separata（Walker）属于鳞翅目夜蛾科,是一种重大迁飞性害虫,大发生时可严重危害水稻、小麦、粟、玉米等禾谷类粮食作物和棉花、豆类、蔬菜等经济作物。为了实现对粘虫的绿色可持续防治,宜根据粘虫的发生规律与农作物的生长规律,采用包括农业防治、物理防治、生物防治和化学防治在内的综合防治措施。特别是微生物农药和化学农药的联合使用将有助于实现“两减”目标。昆虫具有高效的的先天免疫系统,能清除入侵的病原微生物,削弱微生物农药的杀虫效果。因此,鉴定并分析昆虫的免疫蛋白家族,有助于发现它们参与清除病原微生物的作用机理,指导微生物农药的开发,提高生物防治的效果。C型凝集素（C-type lectin,CTL）是动植物中都普遍存在的一类凝集素,大部分可以借助于钙离子识别不同的糖基,在调控发育和免疫反应中发挥重要作用。到目前为止,对东方粘虫C型凝集素家族还没有进行过系统鉴定和分析。因此本研究首先构建了粘虫的转录组,然后从中鉴定了35个C型凝集素,并对它们的序列、进化关系、配体类型、保守氨基酸残基进行了分析,最后通过荧光定量PCR研究了这些CTL基因的发育期和组织表达模式,以及细菌和真菌对它们的诱导表达模式。主要研究结果如下:1.粘虫转录组测序与分析通过对东方粘虫的幼虫进行转录组测序,组装得到45888条Unigene,平均长度为910bp,与之前已报道的粘虫转录组结果相近。将所获得的Unigene对不同数据库进行了功能注释（包括NR、GO、KEGG、Pfam、egg NOG和Swiss-Prot）,其中,18157条Unigene可以同源比对到NR数据库的其他物种中,8035条Unigene进行了GO注释,8836条Unigene进行了KEGG注释,17125条Unigene进行了egg NOG注释。这些Unigene富集于不同的信号通路中,包括信号转导、内分泌系统、细胞群落和免疫系统等。2.粘虫C型凝集素的鉴定、进化关系和序列特征分析从转录组数据库中共鉴定出35个CTL,其中6个CTL-S（CTL-S1～CTL-S6）含有单个糖识别域（carbohydrate-recognition domains,CRD）,29个immulectin（IML-1～IML-29）含有串联排列的双CRD。系统进化分析表明,IML呈现出显著的系特异性扩增现象（lineage-specific expansion）,而CTL-S并没有这种现象。此外,对64个CRD序列的联配分析表明,15个CRD含有典型的EPN基序,12个CRD含有典型的QPD基序,其余37个CRD则含有非典型的基序。3.发育期、组织和诱导表达模式分析根据荧光定量PCR结果,大部分CTL-S主要在卵和早期幼虫中表达,而大部分IML在中晚期幼虫或蛹中表达。在中肠幼虫中,血细胞、脂肪体和表皮是主要表达CTL的组织。在注射大肠杆菌、金黄色葡萄球菌或球孢白僵菌孢子6小时或24小时后,幼虫的血细胞、中肠和脂肪体中均有不同CTL的表达呈现显著上调。本研究鉴定了东方粘虫的C型凝集素家族,开展了序列、系统进化关系、结构和配体预测,以及发育期、组织和诱导表达模式的分析。相关数据为进一步研究CTL在东方粘虫免疫反应中的功能,开展生物防治奠定了基础。