【摘 要】
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我们选取hOLF44和OLFM1作进一步的生物特性阐述及功能研究.Western印迹表明hOLF44和OLFM1蛋白均能从瞬间转染的COS-7细胞中分泌到细胞外,同时也均能从CHO细胞株中稳定表达并
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我们选取hOLF44和OLFM1作进一步的生物特性阐述及功能研究.Western印迹表明hOLF44和OLFM1蛋白均能从瞬间转染的COS-7细胞中分泌到细胞外,同时也均能从CHO细胞株中稳定表达并分泌到细胞外.去糖基化实验结果表明hOLF44和OLFM1都有不同程度的糖基化修饰.这两个结果说明hOLF44和OLFM1都是分泌糖蛋白.Northern印迹表明hOLF44 mRNA在胎盘大量表达,在肝脏和心脏中等表达,而在其它检测的组织中表达量很低.进一步的免疫组化结果表明,在胎盘中,hOLF44蛋白主要分布在合体滋养层细胞的细胞间隙;在肝脏中,hOLF44蛋白主要定位在肝细胞的细胞间隙.因此,hOLF44蛋白很可能是一个胞外基质蛋白,并且可能在胎盘和胎儿的发育中发挥重要作用,或者在其它的生理过程中扮演类似角色.Northern印迹和斑点印迹考察OLFM1的组织表达谱的结果表明OLFM1 mRNA在脑中大量且特异表达.进一步的半定量RT-PCR结果表明OLFM1的直系同源基因Pancortin-3的mRNA表达水平与小鼠脑的发育相关联.这提示OLFM1可能在人脑的发育中扮演重要角色.此外,对OLF分泌蛋白家族的进化分类分析表明该家族是由七个在进化和生物学功能层面上具有独特特点的亚家族构成;hOLF44所聚类的OLF亚家族V是一个新确定的亚家族;OLF结构域与其偶联的非OLF结构域是共进化并且有功能上的相互依赖性.首次报道的OLF基因家族的分类和进化信息对预测和理解OLF基因的功能有重要的帮助.分析结果同时也展示了一种通过分析基因家族的进化分类信息来预测基因功能的有效策略.
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