【摘 要】
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该研究从中国人胎肝组织中克隆重Endostatin cDNA,测定其DNA序列;构建原核表达载体,在大肠杆菌中进行原核表达,部分纯化该物质,测定其抗血管形成活性;与TNF融合并原核表达以
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该研究从中国人胎肝组织中克隆重Endostatin cDNA,测定其DNA序列;构建原核表达载体,在大肠杆菌中进行原核表达,部分纯化该物质,测定其抗血管形成活性;与TNF融合并原核表达以期获得新型的药效更强、性质更稳定的Endostatin.该研究结果为:(1)克隆重鉴定了中国人Endostatin基因,并与美国白人Endostatin基因进行比较,二者序列完全一致,初步说明了Endostatin的编码序列是较为保守的.(2)构建了Endostatin的原核表达载体,对表达的Endostatin蛋白复性液进行了纯化以及活性研究.原核表达Endostatin可诱导血管内皮细胞凋亡,显著抑制血管内皮细胞的生长增殖.(3)将Endostatin和TNF进行融合表达,初步实验表明Endo-TNF融合蛋白对血管内皮细胞的生长抑制作用强于Endostatin,且Endo-TNF融合蛋白同时兼具TNF的肿瘤细胞杀伤作用,初步达到了预先设计的经改造增强Endostatin生物活性的目的.
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