论文部分内容阅读
以甘蓝的6 种基因型为材料,进行花药培养。研究甘蓝基因型和培养基种类对花药诱导培养以及分化培养的影响,并对甘蓝花药培养获得的再生植株进行倍性鉴定和植株移栽方法的研究;同时,以F2P192 和F2P194 为材料,研究激素、活性炭、预处理、培养条件、取材部位以及培养基中的蔗糖浓度对甘蓝花药诱导培养的影响。研究表明: 1. 基因型是影响甘蓝花药培养成功与否的主要因素。不同基因型的甘蓝花药培养的诱导率差异显著,以F2 代材料F2P192 的诱导率最高,为69.17%;而F1 代材料F1S13最低,只有35.83%;基因型对分化率影响也很大,在6 种基因型中只有F2P194 和S3P202分化成苗,分化率为9.26%和1.61%。F2 代材料获得相对较高的诱导率。2. 培养基种类对甘蓝花药的诱导培养和分化培养都具有一定影响,以B5 培养基作为基本培养基较适合甘蓝花药诱导培养;分化培养基1/2MS+ BA1.0+KT1.0+ NAA0.1 较适合诱导愈伤组织分化芽,分化率为2.27%;适量添加KT 有利于诱导芽的分化。3. 通过花药培养中获得的甘蓝再生植株容易生根,以1/2MS+KT 2.0+ NAA 0.1+0.8%Agar+3%Suc 作为生根培养基,生根率为100%;采用分步移栽的方法,可使再生植株很容易适应外界环境条件,成活率达100%。4. 应用气孔保卫细胞长度可以快速、准确的鉴定再生植株倍性。5. 极差分析显示,2,4-D 在花药诱导培养中具有重要的影响作用,各激素组合中以2,4-D2.0+KT2.0的激素组合较适合诱导培养。活性炭对甘蓝花药培养没有促进作用,添加活性炭的处理比不添加活性炭处理的诱导率略低。在花药培养前对花蕾进行4℃ 72h 的低温预处理,并且培养初期给予花药30℃ 72h的高温暗培养,可以获得较好的诱导效果,诱导率为25%;同时,级差分析显示培养初期进行高温暗培养对诱导率的影响作用较大。在同一生长时期,从同一植株的不同部位取材对甘蓝花药诱导培养没有显著影响,花药培养中没有体现顶端优势的作用。6%蔗糖浓度处理的诱导率为30.56%,显著高于3%蔗糖浓度的处理,高浓度的蔗糖有利于花粉小孢子的萌发,提高诱导率。