微生物细胞表面展示外源蛋白在重组活菌疫苗的开发、全细胞生物催化、生物吸附等众多领域有广泛的应用.为了开发多效价载体疫苗,本研究首先考察了在鳗弧菌减毒活疫苗中使用表面展示系统展示外源蛋白的可行性.基于来源于丁香假单胞菌的冰核蛋白外膜定位元件构建了不同的表面展示系统,以绿色荧光蛋白GFP作为报告蛋白,考察了鳗弧菌通过展示系统对GFP的表达以及展示的情况,证明基于冰核蛋白外膜定位元件构建的表面展示载体在鳗弧菌减毒活疫苗中可以正确的表达和展示外源的GFP蛋白.进一步的载体疫苗开发通过在表面展示系统中融合各种推断有抗原活性的外源蛋白展开,分别将一个来源于三型分泌系统中的功能蛋白EseB和一个来源于大黄鱼虹彩病毒的主要衣壳蛋白MCP融合到展示系中,在鳗弧菌减毒活疫苗中进行表达和展示.证明鳗弧菌可以通过冰核蛋白表面展示系统将外源的EseB蛋白和MCP蛋白展示到细胞表面。进而使用斑马鱼作为模式动物对载体疫苗候选株VA(pNE)的免疫效果进行了实验室规模的初步测试和评价,结果表明该疫苗免疫斑马鱼后对鳗弧菌野生株MVAV425有很好的免疫保护力,而对迟钝爱德华氏菌野生株EH202则没有保护力,主要源于EseB蛋白本身没有很好的抗原活性. 本研究最终在鳗弧菌减毒活疫苗的基础上成功建立了基于冰核蛋白表面展示系统的载体疫苗开发的平台技术,以及使用斑马鱼为模式动物对疫苗进行实验室规模的免疫效果的测试和评价的方法。