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目的: 脑胶质瘤起源于脑神经胶质细胞,是中枢神经系统最常见的原发性恶性肿瘤,占颅内肿瘤的40%~50%,通常呈浸润性生长,无完整的包膜,手术不易完全切除。目前,治疗以手术为主,可肉眼全切或大部切除,术后配合放射治疗或化学治疗,但总体疗效不佳,术后复发快、预后差,严重影响人类的生命和健康,是神经外科治疗中相对棘手的难治性肿瘤之一。因此,寻求有效的治疗措施刻不容缓,而想达到这一目的,首先必须解决的问题是明确胶质瘤的发病机制。深入研究胶质瘤发生、发展的分子机制可能为临床胶质瘤的治疗提供新方法。本研究通过对CUL4B和TCF-4表达与人胶质瘤病理学特点和分级进行研究,评估CUL4B和TCF-4与胶质瘤病理学级别的关系,并探讨其在胶质瘤发生发展中的作用。 方法: 标本:取自中国医科大学附属第一医院神经外科2012年1月-2013年9月手术切除的脑胶质瘤标本49例,其中男20例,女29例;年龄15-72岁,所有病例术前未行放化疗。标本用10%中性甲醛固定,常规石蜡包埋,2.5μm连续切片,并作HE染色确定诊断Ⅰ级9例,Ⅱ级12例,Ⅲ级17例,Ⅸ级11例。 主要试剂:CUL4B兔抗人单克隆抗体购自北京博奥森公司,TCF-4兔抗人单克隆抗体。SP染色试剂盒和DAB试剂盒均购自北京博奥森公司。 实验方法和结果判定:应用免疫组化SP法检测人脑胶质瘤中CUL4B和TCF-4表达情况,取一组行HE染色并校对胶质瘤病理级别,再行SP免疫组化法检测CUL4B及TCF-4以细胞核和细胞质中出现棕褐色颗粒或均一棕色定义为免疫组化阳性。对于每张切片随机选择10个高倍视野(×400)每个视野阳性≥5个,即为阳性。阳性程度分级,无阳性细胞计为(-),阳性细胞占细胞总数≤30%为(+),阳性细胞占细胞总数30%-50%为(++),阳性细胞占细胞总数≥50%为(+++)。 统计分析:把胶质瘤Ⅰ和Ⅱ级合并为低级别组,把胶质瘤Ⅲ和Ⅸ级合并为高级别组,采用X2检验计算低级别组与高级别组之间的差异,再以等级资料的相关分析计算X2值来分析CUL4B及TCF-4二者的相关性,检验水准:a=0.05。 结果: TCF-4:TCF-4蛋白阳性产物主要位于瘤细胞胞质,呈棕褐色颗粒,49例TCF-4蛋白阳性表达率为61.23%(30/49),低级别脑胶质瘤(Ⅰ级+Ⅱ级)TCF-4蛋白阳性表达率为28.57%(6/21),高级别脑胶质瘤(Ⅲ级+Ⅸ级)TCF-4蛋白阳性表达率85.71%(24/28),低级别胶质瘤(Ⅰ级+Ⅱ级)与高级别胶质瘤(Ⅲ级+Ⅸ级)差异具有显著性(P<0.05)。 CUL4B:CUL4B蛋白阳性产物主要位于瘤细胞胞质,呈棕褐色颗粒,49例CUL4B蛋白阳性表达率为55.12%(27/49),低级别脑胶质瘤(Ⅰ级+Ⅱ级)CUL4B蛋白阳性表达率为33.33%(7/21),高级别脑胶质瘤(Ⅲ级+Ⅸ级)CUL4B蛋白阳性表达率为71.43%(20/28),低级别脑胶质瘤(Ⅰ级+Ⅱ级)与高级别脑胶质瘤(Ⅲ级+Ⅸ级)差异具有显著性(P<0.05)。CUL4B与TCF-4表达的相关性:CUL4B蛋白阳性表达的27例胶质瘤当中有20例同时表达TCF-4蛋白。统计学显示CUL4B与TCF-4有一定的相关性(P<0.05)。 结论: 1、CUL4B与TCF-4表达水平与胶质瘤恶性程度呈正相关。 2、CUL4B与TCF-4的表达呈正相关。