论文部分内容阅读
为获得大量优质廉价的早期胚胎,满足胚胎工程研究和生产的需要,本试验进行了屠宰山羊卵巢卵母细胞体外成熟培养与体外受精的研究。 从屠宰场取来的山羊卵巢,采用抽吸法和切割法回收可培养的有腔卵泡卵母细胞。本试验比较了在基础培养液中分别添加15%FBS、10%FBS、20%ENGS、15%ENGS对卵母细胞体外成熟培养的影响,四种培养液培养卵母细胞的成熟率分别为:61.12%、64.49%、72.37%和67.62%。培养液1的培养效果极显著低于培养液3和培养液4的培养效果(P<0.01)。培养液3中的卵母细胞成熟率极显著高于培养液2(P<0.01),显著高于培养液4的卵母细胞成熟率(P<0.05)。 为了研究培养温度对卵母细胞体外培养的影响,本试验分别在37℃、38.5℃、39℃对山羊的卵母细胞进行培养。成熟率分别为:50.00%、65.66%、71.15%。结果表明37℃和39℃两种培养温度下的卵母细胞成熟率相比差异极显著(P<0.01)。37℃的卵母细胞体外培养成熟率与38.5℃的相比差异显著(P<0.05)。 卵母细胞的体外培养时间对其成熟率及其成熟后的体外受精率有一定的影响。通过对卵母细胞分别进行18h、20h、24h、26h的体外成熟培养,成熟率为:53.22%、59.94%、71.70%和72.12%,体外受精后各组的受精率分别为:48.22%、56.70%、60.56%和61.12%。结果表明,卵母细胞培养24~26h成熟率极显著高于其他组,受精率极显著高于培养18h组。 卵母细胞培养成熟用于体外受精后获得62.5%的体外受精率,超数排卵得到的20枚卵母细胞进行体外受精,获得了65.0%的受精率,略高于前者。 采集大腔卵泡卵母细胞和小腔卵泡卵母细胞分别进行培养,结果发现,大腔卵泡卵母细胞的体外成熟率为71.47%,体外受精率为60.19%,均极显著高于小腔卵泡卵母细胞(24.13%、32.78%)。