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                                目的:通过放射免疫学(Radioimmunoassay,RIA)的方法来研究甲状旁腺激素相关蛋白(Parathyroid hormonerelated protein,PTHrP)与肿瘤(肺癌、乳腺癌)骨转移的相关性,为临床工作中实体肿瘤骨转移的诊断提供新的思路。
    方法:收集2006年12月至2007年10月,河北医科大学第三医院放疗科实体肿瘤患者57例,年龄33-76岁,中位年龄61岁。男性28例,女性29例。肺癌33例,乳腺癌24例,其中伴发骨转移者28例。正常对照31例,为我院同期健康体检者,年龄35-75岁,中位年龄64岁(均排除肿瘤及甲状旁腺疾病)。根据CSCO最新发布的2007版《实体瘤(肺癌,乳腺癌)骨转移临床诊疗专家共识》中提出的骨转移的诊断方法对肿瘤患者进行分组。A组为伴发骨转移的肿瘤患者;B组为无骨转移的肿瘤患者。C组为正常对照。
    肿瘤患者及对照组于体检时空腹抽取外周静脉血2ml,置于含EDTA 100μ1的VT6450管中,振荡试管数次,再将标本移入含抑肽酶(0.6TIU/m1)的离心管中,振荡试管数次。4℃离心标本,1600×g,15分钟。离心后提取上清液300 μl,保存于0.5ml,离心管中,-70℃冰箱冰冻保存。采用放射免疫法(RIA),使用美国Phoenix Pharmaceuticals公司生产的PTHrP(1-34)放免试剂盒,按实际说明书操作,使用西安核仪器厂生产的XH-6020 γ-放射免疫计数器进行测定,对结果进行分组比较,统计分析。另外,本试验还对肿瘤组患者血清钙、磷、总碱性磷酸酶水平进行检测。抽取血样当天,检测肿瘤患者血Ca,P,ALKP,并比较结果。血钙正常值范围2.10-2.62mmol/L,>2.62 mmol/L为高血钙。血磷正常值范围0.97-1.61mmol/L,<0.97mmol/L为低血磷。血清碱性磷酸酶正常值范围15-131U/L。采集数值后,采用SPSS15.0统计包建立数据库进行统计学分析。
    结果:共测定标本88例,肿瘤患者57例,其中骨转移者28例,无骨转移者29例。健康人对照31例。(1) 该实验3组均可检测出PTHrP,各组检出率均为100%。 (2) 肿瘤骨转移组、无骨转移组、正常对照组PTHrP水平各不相同,分别为48.41±4.59pg/100μl,40.31±4.00pg/100μl ,36.85±5.63pg/100 μl。骨转移组的PTHrP值均高于无骨转移组和正常对照组,三组间比较差异显著,有统计学意义(F=44.125,P=0.000<0.001)。(3) 肿瘤骨转移组患者PTHrP值显著高于无骨转移组,两组间比较差异显著,有统计学意义(P=0.000<0.001)。(4) 肿瘤骨转移组患者PTHrP值显著高于正常对照组,两组间比较差异显著,有统计学意义(P=0.000<0.001)。 (5) 肿瘤无转移组患者PTHrP水平高于正常对照组水平,两者差异显著,有统计学意义(P=0.007<0.01)。 (6) 对肿瘤患者血钙水平进行检测,骨转移组与无骨转移组无显著差异(t=0.401,P=0.690>0.05)。(7) 对肿瘤患者血磷水平进行检测,骨转移组与无骨转移组无显著差异(t=-0.548,P=0.586>0.05)。(8)对肿瘤患者血清碱性磷酸酶水平进行检测,骨转移组与非骨转移组有显著差异(t=2.983,P=0.008<0.01)。骨转移组患者血清碱性磷酸酶水平显著高于无骨转移组患者。(9) 以46.6pg/100μl为临床考虑伴发骨转移的标准,试验中假阴性率:28.6%,假阳性率为24.1%:灵敏度为71.4%,特异度为75.9%。
    结论:本研究中,肺癌和乳腺癌骨转移患者体内PTHrP水平高于无骨转移患者,且明显高于健康对照,三者间差异显著,具有统计学意义。说明PTHrP与肿瘤骨转移的发生有相关性,血清PTHrP水平可间接提示肿瘤骨转移的发生。本试验中肿瘤患者骨转移与无骨转移两组之间血钙、血磷水平无显著差异,均值都在正常范围内,提示血钙、血磷未能明确提示肿瘤骨转移的发生。两组肿瘤患者血清碱性磷酸酶水平有显著差异,骨转移组患者血碱性磷酸酶水平明显高于无骨转移组患者,两者差异显著,具有统计学意义,但其检测结果尚未超过正常值范围,提示碱性磷酸酶对恶性肿瘤骨转移的诊断不具有特异性。