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目的:研究热休克蛋白27(heat shock protein 27,HSP27)磷酸化在血管紧张素II(angiotensinⅡ,AngII)与血小板源性生长因子-BB(platelet derived growth factor-BB,PDGF-BB)诱导的自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)迁移中的作用及其作用机制。方法:采用体外培养SHR胸主动脉平滑肌细胞;用特异性的单克隆Phospho-HSP27抗体的蛋白免疫印迹法(Western blot)检测HSP27的活性;用FITC-鬼笔环肽标记F-actin并在激光共聚焦显微镜下观察细胞骨架的形态变化;采用改良的Boyden微孔膜双槽法进行细胞迁移实验。结果:第一部分:AngII和PDGF-BB呈浓度依赖性诱导VSMCs的HSP27磷酸化,使VSMCs内F-actin数量明显增加,纵向平行排列,形成应力纤维丝,并促进细胞迁移。AngII(10-7mol/L)和PDGF-BB(30ng/ml)诱导后VSMCs的HSP27磷酸化水平在30分钟达高峰。AngII和PDGF-BB均能诱导VSMCs的HSP27磷酸化,作用峰值浓度分别为10-5mol/L和100 ng/ml,分别较对照组增高338.9%和159.1%(P<0.01)。HSP选择性阻断剂槲皮素以浓度依赖性方式抑制AngII和PDGF-BB诱导的HSP27磷酸化,最大抑制率分别为71.7%和66.7%(P<0.01)。100 umol/L槲皮素可阻抑AngII、PDGF-BB刺激VSMCs后产生的应力纤维丝形成,对AngII、PDGF-BB诱导的VSMCs迁移的抑制率分别为55.3%和53.6%(P<0.01)。第二部分:选择性阻断HSP27磷酸化的上游信号转导通路中的P38丝裂原激活蛋白激酶(P38 mitogen-activated protein kinase,P38MAPK)、磷脂酰肌醇-3激酶(phosphoinostide-3 kinase,PI3K)和细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal regulated kinase1/2,ERK1/2)能有效抑制HSP27的磷酸化水平,并减少VSMCs迁移。P38MAPK选择性抑制剂SB202190、PI3K选择性抑制剂LY294002和ERK1/2选择性抑制剂U0126均呈浓度依赖性抑制AngII和PDGF-BB诱导的HSP27磷酸化,对AngII诱导的HSP27磷酸化的最大抑制率分别为87.2%、78.4%和37.3%(P<0.01),对PDGF-BB诱导的HSP27磷酸化的最大抑制率分别为85.0%、55.3%和41.0%(P<0.01)。100umol/L SB202190、30umol/L LY294002和30umol/L U0126均能有效抑制AngII、PDGF-BB刺激VSMCs后产生的应力纤维丝形成,对AngII诱导的VSMCs迁移的抑制率分别为60.1%、71.7%和47.3%(P<0.01),对PDGF-BB诱导的VSMCs迁移的抑制率分别为55.3%、55.6%和38.1%(P<0.01)。第三部分:AT1受体拮抗剂坎地沙坦可以明显抑制AngII诱导的HSP27磷酸化。PDGF受体拮抗剂曲匹地尔能显著抑制PDGF-BB诱导的HSP27磷酸化。氟伐他汀抑制AngII和PDGF-BB诱导的HSP27磷酸化,并有量效关系,抑制作用在10-5mol/L时最显著,最大抑制率分别为42.1%和58.5%(P<0.01)。阿魏酸钠也以剂量依赖性方式抑制AngII和PDGF-BB诱导的HSP27磷酸化,在10-4mol/L时抑制作用最明显,最大抑制率分别为39.0%(P<0.05)和56.8%(P<0.01)。结论:1、HSP27的磷酸化可能介导AngII与PDGF-BB诱导的VSMCs的细胞骨架重建和迁移。2、P38MAPK和PI3K/AKT是AngII、PDGF-BB诱导HSP27磷酸化和VSMCs迁移的重要途径,ERK1/2部分参与AngII、PDGF-BB诱导的HSP27磷酸化和VSMCs迁移。3、氟伐他汀、阿魏酸钠可能通过抑制HSP27磷酸化影响VSMCs的迁移。