【摘 要】
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疾病生物标志物的灵敏检测有助于疾病的早期诊断,提高患者的生存率和生存质量。心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)作为急性心肌梗死(AMI)的一种新型生物标志物,可以在心肌损伤发生90分钟内,释放到循环系统中并在血液样本中检测到。相较于目前临床常用的生物标志物肌钙蛋白T,H-FABP有更好的及时性。因此,准确、灵敏检测H-FABP对AMI的早期诊断和及时治疗具有重要的临床意义。目前,酶联免疫吸附法和化学
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疾病生物标志物的灵敏检测有助于疾病的早期诊断,提高患者的生存率和生存质量。心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)作为急性心肌梗死(AMI)的一种新型生物标志物,可以在心肌损伤发生90分钟内,释放到循环系统中并在血液样本中检测到。相较于目前临床常用的生物标志物肌钙蛋白T,H-FABP有更好的及时性。因此,准确、灵敏检测H-FABP对AMI的早期诊断和及时治疗具有重要的临床意义。目前,酶联免疫吸附法和化学发光免疫测定法是临床上常用的H-FABP检测方法,但这些方法需要昂贵的仪器设备、专业的技术人员和繁琐的操作流程,并且灵敏度有限。因此,本工作基于高效的自增强固态发光体策略和超薄Ni-TCPP(Fe)纳米片层的信号放大效能,开发了一种简便、实用的电化学发光免疫传感新方法用于高灵敏、高特异检测H-FABP。在这项工作中,首先合成了具有优越比表面积和丰富活性位点的超薄Ni-TCPP(Fe)纳米片层,其具有出色的过氧化物酶模拟活性可以有效加速H2O2的氧化分解,从而增强鲁米诺的ECL信号。此外,Ni-TCPP(Fe)纳米片作为理想的纳米载体可以同时固载PEI和鲁米诺来构建自增强型固态发光体(Ni-TCPP(Fe)-PEI-Lum),具备优异的ECL效率和良好的稳定性。另外,将具备优异导电性和丰富结合位点的聚(吲哚-5-羧酸)(PICA)作为电极基底固定一抗,以进一步提高灵敏度。在最佳实验条件下,设计的ECL免疫传感器检测范围达到100 fg m L-1~100 ng m L-1,检测限低至44.5 fg m L-1,具有优良的特异性和稳定性,并成功地用于检测血清中的靶标H-FABP。这项工作所构建的特异、灵敏电化学发光免疫新方法不仅可为临床检验诊断中生物标志物检测提供新的分析手段,还能扩展二维MOF纳米片在ECL技术中的应用潜能。
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