近年来,保护遗传学基础研究与实践的结果表明,物种或亚种的起源、进化历史、种群间的基因流和种群遗传多样性等遗传背景的有关参数,是制定物种保护策略之最重要的科学依据之一.小种群必然会导致近交的出现,并造成后代多态位点的丧失和种群纯合度的上升.基于此,寻找一种能有效检测种群遗传背景相关参数的遗传标记,是查明物种遗传背景的前提,而对种群大样本数的群体检测,则是衡量其遗传背景相关参数可信度的基础.该文以《大熊猫保护遗传学研究》为博士论文命题,开展了相关研究,并获得了如下结果:(1)虽然乙醇逐级脱水对于DNA的提取是极为重要的,但是,它不能完全祛除固定组织中的福尔马林,从而不能获得高分子量的DNA.(2)该文研制了大熊猫的第二代寡核苷酸指纹探针gp2000.GP2000除了能准确地鉴别个体和阐明种群结构与遗传结构外,其检测的遗传信息位点已由原来的36个增加到了39个,并检测出了大熊猫的物种特征带和除秦岭种群以外的其余五个山系种群的特征带.(3)两个大种群——岷山和邛崃种群,有最高的遗传多样性.而最小的两个种群——大相岭和小相岭种群,显示出最低的遗传变异能力,并存在着严重的近交.秦岭种群虽然较岷山和邛崃种群小,且具有最少的条带数和最狭窄的谱带分布范围,但却与岷山和邛崃种群处于同一遗传多样性水平.(4)遗传多样性的分析结果表明,大熊猫的种群越大,栖息地片段化对其遗传多样性的影响就越显著;大熊猫的种群越小,种群数量的减少对其遗传多样性的影响也越显著.(5)DNA指纹图谱,揭示了大熊猫六个山系具有包括早期隔离、中期分化和近期遗传退化等三种不同的分化模式.大约10000年前的冰川作用,导致了秦岭种群和其他种群在DNA指纹图和形态特征两方面,均出现了显著差异.(6)DNA指纹图、酶切位点的错配分布、DNA中性检验和单倍型的最小空间网络结构图综合显示:作为一个物种,大熊猫经历了两次瓶颈:①约24000年前的冰川事件,导致了大熊猫的第一个完全性瓶颈——不足10只的大熊猫个体在秦岭山系存活下来;②约10000年前的冰川期,导致了大熊猫的局部瓶颈,即第二个非完全性瓶颈——不足10只的大熊猫个体,幸存于小相岭山系,并成为四川亚种的奠基者.(7)研究表明,大熊猫大种群与小种群之间的个体迁移,能在整个种群的谱带分布图形上留下特征性标记.基于上述研究结果,该文以优先等级的排列顺序,提出了以下保护对策:(1)秦岭和小相岭山系,应尽快实施圈养保护计划;(2)在现存圈养种群中,应避免秦岭亚种和四川亚种个体之间的杂交配种.对于已繁殖的杂交后代,应将其排除于日后的繁殖计划之外;(3)人为地将凉山种群的个体,适量地引入小相岭种群;(4)在小相岭、大相岭和凉山种群之间,建立绿色走廊,促进山系之间的个体交流,使三个隔离的种群连为一个大种群;(5)在岷山A和岷山B种群之间、岷山大种群和邛崃种群之间建立绿色走廊;以保持大种群的进化潜力;(6)对六大山系的人类活动加以限制.