论文部分内容阅读
目的 脑卒中是危害人类健康和生命的重要疾病，其发病率、致残率及死亡率均高，给个人、家庭及社会带来沉重的负担。缺血性脑卒中(IschemicStroke，IS)是脑卒中的主要类型，占脑卒中的70％以上。目前普遍认为缺血性脑卒中是由多个基因和环境因素共同作用导致的一类极其复杂的疾病。因此，积极寻找缺血性脑卒中的发病危险因素并积极有效的预防治疗，降低其发病率显得尤为重要。 近年来研究主要都是集中于编码基因中的SNPs，基因组序列中98％以上的非编码基因如miRNA基因中的SNP研究得很少。miR-146a、miR-196a2分别通过作用于靶基因肿瘤坏死因子受体相关因子（TRAFs）、IL-1受体相关激酶(IRAK)和膜联蛋白A1(AnnexinA1)，从而参与动脉粥样硬化的发生发展。 全基因组扫描发现位于10q11.21，在CXCL-12基因下游附近rs1746048、rs501120和动脉粥样硬化病理过程相关[28]，并能增加心血管疾病发病风险。CXCL-12是一个有效的血小板激动剂，可活化血小板，促进动脉粥样硬化发生。CXCL-12还可以通过损伤血管内皮，促进炎症反应。综上所述，CXCL-12在动脉粥样硬化斑块形成、发展及血栓形成过程中起着关键作用。 因此，本课题拟在探讨miR-146a(rs2910164)、miR-196a2(rs11614913)、CXCL-12（rs1746048和rs501120）四个位点多态性与中国北方地区汉族人群缺血性脑卒中发病的关系。通过上述研究，探讨miR-146a、miR-196a2、CXCL-12基因是否为中国人群缺血性脑卒中发病的易感基因，从分子水平认识其发病机制，从而提高对该病的预防，诊断及治疗。 方法 采用病例-对照研究方法，病例组来自2011年-2012年间存中国医科大学附属第一医院神经内科缺血性脑卒中患者共368例，其中男性253例、女性115例，年龄在40-80岁间，均为汉族，无亲缘关系，按照TOAST分型标准分为大动脉粥样硬化组（largearteryatherosclerosis，LAA）和小动脉闭塞组(smallarteryocclusion，SAO)。对照组来自沈阳市红十字会医院体检中心，并选取性别、年龄与IS组相匹配的健康个体381例，男性261例、女120例，采用聚合酶链式反应-连接酶检测反应的技术测定并分析368例IS患者和381例健康对照者miR-146a(rs2910164)、miR-196a2(rs11614913)、CXCL-12（rs1746048和rs501120）多态位点在对照组与IS组及各亚组中的频率分布，最后结合临床资料，对相关数据进行条件Logistic回归方法排除传统混杂因素的干扰，以P＜0.05为检验水准，以分析不同基因型对缺血性脑卒中和各亚组中发生的影响。 结果 1、所有研究对象的每个SNP位点的基因型在抽样群体中的分布均符合Hardy-Weinberg平衡(P＞0.05)，表示所选取的样本具有人群代表性，适合做遗传学分析。 2、miR-196a2rs11614913位点基因型与等位基因频率分布不论在组间或者亚组间比较都没有显著性差异(p＞0.05)。 3、miR-146ars2910164CC基因型及C等位基因在病例组和对照组差异无统计意义(p＞0.05)。将IS组按不同病因分为大动脉粥样硬化型(LAA)和小动脉闭塞型(SAO)。在LAA亚组比较中，miR-146ars2910164CC基因型及C等位基因频率明显高于对照组(p=0.019和p=0.004)。携带CC基因型的个体发生大动脉粥样硬化型缺血性脑卒中的危险是CG+GG基因型的1.694倍(95％CI=1.199-2.395;p=0.003)，校正各种混杂因素后发病危险度为1.666倍(95％CI=1.158-2.398;p=0.006)。 4、CXCL-12基因rs1746048病例组CT+TT基因型及T等位基因的频率均高于对照组，二者差异有统计学意义(OR=1.421，p=0.017，95％CI:1.064-1.900;OR=1.281，p=0.023，95％CI:1.035-1.586)，在男性亚组的比较也得到了相同的结果（OR=1.923，95％CI:1.348-2.743，p=0.000）。女性IS组与女性对照组比较无明显差异。校正各种混杂因素后发病危险度为1.401倍(95％CI:1.031-1.901，p=0.031)。 5、CXCL-12基因rs501120位点基因型的频率IS组与对照组比较无统计学意义(p＞0.05);按性别分层后发现在男性IS组与男性对照组比较，发现病例组CT+CC基因型的频率和等位基因C频率明显高于对照组(OR=1.739，p=0.002，95％CI:1.216-2.486;OR=1.416，p=0.007，95％CI:1.100-1.824)。女性IS组与女性对照组比较无明显差异。应用Logistic回归校正分析后仍有统计学差异(OR=1.778，95％CI:1.212-2.609,p=0.003)。 结论 1、miR-196a2rs11614913位点与中国北方汉族人群的IS发病无相关性。 2、miR-146ars2910164位点CC基因型及C等位基因可增加中国北方汉族人群大动脉粥样硬化型缺血性卒中的发病风险，是中国北方汉族人群大动脉粥样硬化型缺血性卒中的独立危险因素。 3、CXCL-12基因rs1746048位点CT+TT基因型和等位基因T可增加中国北方汉族缺血性脑卒中的发病风险，尤其是男性;是缺血性脑卒中发病的独立危险因素。 4、CXCL-12基因rs501120位点CT+CC基因型和等位基因C可增加中国北方汉族男性人群缺血性脑卒中的发病风险，是缺血性脑卒中发病的独立危险因素。