【摘 要】
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选择二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)为主要研究对象,以花生四烯酸(AA)做对照,探索长链多不饱和脂肪酸(PUFAs)对高糖环境下视网膜细胞(RF/6A)生长的影响并探索其作用
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选择二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)为主要研究对象,以花生四烯酸(AA)做对照,探索长链多不饱和脂肪酸(PUFAs)对高糖环境下视网膜细胞(RF/6A)生长的影响并探索其作用机理。采用MTT法测定高糖环境下RF/6A细胞的存活率,发现高浓度葡萄糖可促进RF/6A细胞过度增殖;采用三种PUFAs处理高糖环境下的RF/6A细胞,结果显示AA,EPA及DHA在高低两个浓度下都可以有效抑制由高糖引起的RF/6A过度增殖。因此选择 AA 60 μM 和 180 μM,EPA60 μM 和 160 μM,DHA60μM 和 200μM浓度处理;采用气相色谱分析了 PUFAs处理的RF/6A细胞脂肪酸组成,发现高浓度葡萄糖可改变视网膜细胞对脂肪酸的吸收及细胞脂肪酸代谢;而三种PUFAs能被细胞吸收,并改变RF/6A细胞脂肪酸组成;采用Elisa试剂盒测定不同处理条件下RF/6A细胞白介素-6(IL-6)及生长因子VEGF的表达,结果表明:高浓度条件下AA处理可促进IL-6及VEGF的表达;EPA处理可抑制IL-6表达,促进VEGF表达;而DHA对IL-6表达有显著抑制作用,对VEGF表达无显著性影响。低浓度情况下AA处理可促进IL-6的表达但是会抑制VEGF的表达。EPA和DHA都会抑制IL-6的表达,以DHA的表现最好。但是低浓度DHA处理会出现促VEGF表达的现象。在活性氧试剂盒的测定中发现,AA,EPA都会促进ROS的表达,但是DHA可以有效抑制ROS的表达。因此,三种长链多不饱和脂肪酸中,以DHA效果最好,值得深入研究。以羟丙基-β-环糊精为原料,以DHA为被包埋物,成功制成DHA-HP-β-CD包合物滴眼液。HP-β-CD有效提高脂溶性药物有效穿透角膜的能力。通过IR图谱分析,包合物的谱图基本呈现HP-β-CD的IR谱图特征而不是DHA的IR特征。说明DHA已经被成功包埋故限制了其IR特征的发挥。滴眼液为白色透明澄清液体,pH值为7.31±0.08。
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