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为筛选出对常用有机磷杀虫剂敌敌畏具有较强耐药性的莱氏野村菌（Nomuraea rileyi）突变菌株,本文在紫外线诱变莱氏野村菌基础上,利用敌敌畏对突变菌株进行4次紫外线诱变结合药剂驯化,并对突变株进行了抗性水平、遗传效果、菌丝生长抑制率、继代产孢量、几丁质酶活性测定,验证了突变株对杜仲梦尼夜蛾幼虫的毒力及与敌敌畏协同使用的杀虫效果,研究结果如下:1、通过莱氏野村菌出发菌株在含不同浓度敌敌畏的平板上的生长情况对比得出敌敌畏对莱氏野村菌孢子的致死浓度为1291mg/L,并以此为抗药性致死突变标志。2、本实验以经过紫外线诱变后致死率在70%-80%之间为标准,得出了适合莱氏野村菌紫外线诱变的最佳照射时间为2min和2.5min;经过两次紫外线诱变后筛选出了6株产孢较快、孢子丰富、平均落直径为18.75mm的突变株,分别编号为Nr-UVY1、Nr-UVY2、Nr-UVY3、Nr-UVY4、Nr-UVY5、Nr-UVY6。3、经过4次紫外线诱变加药剂驯化后,筛选得到了能在含敌敌畏浓度为3875mg/L的平板上生长的突变株Nr-UVY1和Nr-UVY6。对敌敌畏的抗性水平测定结果显示,出发菌株的EC50值最小,为851mg/L,致死浓度为1291 mg/L;而两株突变株能在含敌敌畏浓度为3875mg/L的平板上长出菌落且产孢,突变株Nr-UVY1的EC50值为1888mg/L,突变株Nr-UVY6的EC50值为2184mg/L;以莱氏野村菌出发菌株为敏感对照菌株,其抗性水平为1,突变株Nr-UVY1、Nr-UVY6的抗性水平分别是出发菌株的2.22倍、2.57倍。对突变株Nr-UVY1和Nr-UVY6的遗传稳定性测定结果显示,经过连续转接7代后,敌敌畏对2株突变株的生长抑制率差异不大,抗药性遗传基本稳定。4、不同浓度的敌敌畏对2株突变株和出发菌株的菌丝生长均存在不同程度的抑制作用,浓度越高,抑制作用越显著;与出发菌株相比,2株突变株的菌丝对敌敌畏具有显著且稳定的耐药性,突变株Nr-UVY6在含1291mg/L敌敌畏的培养基上的菌丝生长抑制率为37.01%,突变株Nr-UVY1为42.38%,出发菌株为77.59%。随着转接次数的增加,2株突变株和出发菌株的产孢能力均有所下降;2株突变株各代的产孢量均明显高于出发菌株,并且突变株Nr-UVY6各代的产孢量始终高出突变株Nr-UVY1和出发菌株2倍以上;就3株菌株各代产孢量的稳定性来看,2株突变株的稳定性更高,而突变株Nr-UVY6又比Nr-UVY1表现出了更高的稳定性。经过透明圈法测定几丁质酶活性,突变株Nr-UVY6的几丁质酶活力最高,其R2/R1比值为1.5,突变株Nr-UVY1的R2/R1比值为1.1,与出发菌株一样。5、通过对感染莱氏野村菌的杜仲梦尼夜蛾幼虫虫尸进行观察发现,死亡幼虫在感染初期产生局部黑斑,感染中期产生白色菌丝和绿色分生孢子粉,在感染后期虫体逐渐失水僵硬最终干瘪萎缩。毒力测试结果表明2株突变株对杜仲梦尼夜蛾幼虫均具有明显的致死作用,突变株Nr-UVY1在8d内对幼虫的累计致死率为85%,其LT50值为6.2678d,而突变株Nr-UVY6在8d内对幼虫的累计致死率达91.67%,其LT50值为5.7617d;突变株与敌敌畏协同使用增效作用显著,突变株Nr-UVY1、Nr-UVY6分别和敌敌畏协同使用的处理在第3d时的累计校正死亡率分别达到了93.35%、96.70%,第4d时均已高达100%,其LT50值显著减少,分别为1.5830d和1.5436d。