鞭毛是细菌最主要的运动器官,其形成和装配是一个非常复杂的过程,需要超过50种蛋白的协同作用。通过蛋白相互作用网络技术研究鞭毛的调控和装配是一种很有意义的新尝试。　　 本研究以模式病原细菌假结核耶尔森氏菌(Yersiniapseudotuberculosis,Yp)的鞭毛系统为研究对象,利用细菌双杂交高通量筛选技术鉴定了Yp中包括鞭毛结构蛋白以及细菌运动性相关蛋白在内的54种蛋白之间191个相互作用,在此基础上,系统构建了假结核耶尔森氏菌运动性相关蛋白相互作用网络参考图。通过对相互作用网络图分析,发现鞭毛系统重要的负调控蛋白FlgM不仅与F;iA相互作用,还能够与辅助鞭毛胞外蛋白分泌的伴侣蛋白FliS和Flit相互作用,并通过GSTPull-down技术进一步验证了它们之间的相互作用,表明FliS和FliT有可能也是FlgM的伴侣蛋白。随后,通过逐步的片段缺失实验以及细菌双杂交技术,发现FliS和FliT与FliA同FlgM的互作具有相同的结合位点,初步推断FliS和FliT与FliA同FlgM的结合具有竞争关系,这种竞争关系通过细菌三杂交技术以及体外竞争结合实验得到进一步的鉴定。随后的FlgM分泌分析实验表明FliS,FliT能够抑制FlgM的分泌。同时我们也研究了fliA,fliS和fliT突变体对细菌泳动性及各级启动子依赖基因表达的影响,最终揭示了多种鞭毛系统伴侣蛋白通过竞争结合调控FlgM的分泌,从而维持胞内FliA及FlgM相对比例的平衡,使FliA对下游基因的转录激活作用随时处在FlgM的监控之中。该研究进一步揭示了FlgM在鞭毛调控中的核心地位,对深入阐明鞭毛系统的调控机制有重要意义。