【摘 要】
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目的:食管癌是常见的恶性肿瘤之一。其发病率分别占我国和世界恶性肿瘤的第四和第七位,五年生存率仅为10%左右。筛查和发现癌前病变病例对于降低食管癌发病率和死亡率具有重
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目的:食管癌是常见的恶性肿瘤之一。其发病率分别占我国和世界恶性肿瘤的第四和第七位,五年生存率仅为10%左右。筛查和发现癌前病变病例对于降低食管癌发病率和死亡率具有重要意义。目前我国筛查食管癌前病变的方法主要有食管拉网脱落细胞检查和食管内窥镜检查。但前者敏感性较低,约为50~70%,漏检率高,而食管内窥镜检查虽然敏感性较高,但这项技术需特殊设备,操作复杂,价格昂贵,很难作为大规模人群的初筛手段。更重要的是,这两种方法均属侵入性检查,给病人造成痛苦,而且有可能导致传染病的交叉感染,很难为被检人接受。因此,本研究旨在建立一种高敏感度的非侵入性检测方法,以便在高危人群中筛查食管癌前病变,以期降低食管癌的发病率和死亡率。方法:挑选16个SEREX技术筛选、鉴定并经统计学分析优化的食管癌前相关抗原,采用pET-30b(+)原核表达载体将它们在E.coli中进行表达,采用His-Tag亲和层析和SDS-PAGE制备胶电泳纯化表达产物,经复性后用SDS-PAGE和Western Blot鉴定蛋白纯度。结果显示,16个抗原经表达、纯化后获得了纯度大于90%的纯化蛋白。采用接触式芯片点样仪将纯化的16个抗原蛋白点样于醛基化的玻璃片基上制备蛋白芯片。采用这种食管癌抗原蛋白芯片对241例食管癌和234例正常人血清、50例食管癌前轻度不典型增生、50例中度不典型增生、50例重度不典型增生、35例原位癌及50例高发区正常人血清,以及323例食管癌前血清和550例食管癌高发区现场普查人群血清中的IgG和IgM型自身抗体进行了检测。同时通过免疫组化、ELESA法对这一方法进行了分析。结果:结果显示该芯片检测的重复性好,大部分样本(82%的孔
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