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目的:研究不同浓度凝血酶对富血小板血浆(PRP)促骨髓基质细胞增殖作用的影响,得出促细胞增殖作用的最佳凝血酶浓度,并与常用凝血酶浓度1000U/ml比较,观察不同浓度凝血酶对PRP修复颅骨缺损的影响。方法:1.抽取新西兰兔全血制取PRP,按PRP与凝血酶9:1(v/v)加入下列浓度的凝血酶:20U/ml、40U/ml、60U/ml、80U/ml、100U/ml、500U/ml和1000U/ml,制取复合生长因子;抽取同只新西兰兔骨髓,在体外培养扩增,取生长良好的第三代骨髓基质细胞,1×104个细胞/孔植入96孔板中,加入含前述生长因子的10%胎牛血清(FBS)的DMEM液、10%FBS的DMEM液(阳性对照组)及无血清的DMEM液(阴性对照组),用MTT法检测细胞增殖情况,得出促细胞增殖的最佳凝血酶浓度A。2.分别在16只新西兰兔颅骨顶部制备4个直径为8mm的全厚层骨缺损,按随机法采用:1000U/ml浓度凝血酶+PRP+β-TCP、A凝血酶+ PRP+β-TCP、PRP+β-TCP、β-TCP(空白)等治疗修复,分别于术后1个月和3个月取标本,用组织病理学法观察颅骨修复情况。结果:1.不同浓度凝血酶激活的PRP均能促进骨髓基质细胞的增殖,作用明显优于对照组(P<0.05),20U/ml～60U/ml时呈浓度依赖关系,60U/ml为最佳浓度。2.不同浓度凝血酶激活的PRP修复颅骨缺损情况:术后1个月各组新骨生成百分数:1000U/ml组为20.43±2.28%、60U/ml组为21.26±1.41%、单纯PRP组为21.05±3.42%、空白组为17.33±3.15%;术后3个月各组新骨生成百分数:1000U/ml组为36.29±4.01%、60U/ml组为35.89±3.65%、单纯PRP组为42.61±4.86%、空白组为31.57±4.02%。统计学分析结果显示:术后1个月PRP各组新骨生成百分数均高于空白组(P<0.05),但PRP三组间差别无显著性;术后3个月PRP各组新骨生成百分数亦高于空白组(P<0.05),单纯PRP组新骨生成百分数高于其它各组(P<0.05),但60U/ml组和1000U/ml组间差别无显著性。结论:不同浓度的凝血酶对PRP促骨髓基质细胞增殖均具有加强作用,60U/ml为最佳浓度;PRP也可促进骨组织的愈合修复,术后3个月单纯PRP+β-TCP促缺